兼职蛋白聚糖糖基化分子开关的鉴定及其功能调节的阐明-猫眼课题宝

兼职蛋白聚糖糖基化分子开关的鉴定及其功能调节的阐明

批准号：

11877390

负责人：

菅原一幸

金额：

$1.15万

依托单位：

Kobe Pharmaceutical University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Exploratory Research

财政年份：

1999

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

1999 至 2000

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11877390/

关键词：

コンドロイチン硫酸グリコサミノグリカンプロテオグリカン硫酸化オリゴ糖 2-アミノベンズアミド蛍光標識 NALDI-TOF MS プロトンNMR 硫酸化リン酸化ヘパラン硫酸デルマタン硫酸ヘパリン

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项目成果

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グリコサミノグリカンのタンパク質との結合領域は、GlcA-Gal-Gal-Xyl-という共通の四糖構造からなっている。しかし、我々はこの領域に硫酸基やリン酸基などによる微細な修飾構造が存在することを証明し、その構造多様性が生合成に関与する可能性を指摘してきた。ただし、この領域は、グリコサミノグリカンの長い糖鎖全体からみると少量しか存在しないため、その構造解析が非常に困難であった。これまでは、アルカリ性の条件下でNaB^3H_4を用いた還元を行い、グリコサミノグリカン鎖の還元末端を放射標識した後に構造研究が行われてきた。今回我々は、この領域の微量分析法を開発した。ピーリング反応を避けながらβエリミネーションを行うための、LiOHを用いた温和な条件を検討し、実際にコンドロイチン/デルマタン硫酸から、タンパク質との結合領域に由来するオリゴ糖を調製した。得られたオリゴ糖は、酵素消化、MALDI-TOF/MS分析、^1HNMR解析などによって構造決定した。大部分のものは、既に報告されたものと同じ構造をしていたが、新規のものも得た。構造が既に報告されていたオリゴ糖は、今後標準品として利用できるであろう。また、2-アミノベンズアミドを使ってこれらのオリゴ糖を蛍光標識し、結合領域の微量分析方法を確立した。今後は、グリコサミノグリカンの生合成に重要であると予想される結合領域の微細構造が、より詳細に解析されるであろう。

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专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

坂口裕美: "Isolation of Reducing Oligosaccharides Chains from the Chondroitin/Dermatan Sulfate-Protein Linkage Region and Preparation of Analytical Probes by Fluorescent Labeling with 2-Aminobenzamide"J.Biochem.. 129(9). 107-108 (2001)

Hiromi Sakaguchi：“从软骨素/硫酸皮肤素-蛋白质连接区域分离还原寡糖链并通过 2-氨基苯甲酰胺荧光标记制备分析探针”J.Biochem.. 129(9) (2001)。

DOI： --

发表时间：

期刊：

影响因子： --

作者：

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