脳の硫酸化グリコサミノグリカン:機能と生合成のメカニズムへの構造解析によるアプローチ

大脑中的硫酸化糖胺聚糖：功能和生物合成机制的结构分析方法

• 批准号: 02F00543
• 负责人: 菅原 一幸
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Kobe Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02F00543/
• 关键词: コンドロイチン硫酸; デルマタン硫酸; グリコサミノグリカン; FGF; 脳; 海馬; 神経突起伸長; 増殖因子; 中枢神経

ブタの胎児と成体の脳からコンドロイチン硫酸(CS)とデルマタン硫酸(DS)を含む画分を調製し、構造と活性を解析した。分子量はともに40kDaであり、二糖組成も類似していたが、イズロン酸の含量に違いが見られた。成体の試料では総ウロン酸の1%以下であったが、胎児の試料では8〜9%であり、成体ではほとんどCSしか存在しないのに、胎児期にはDS様の構造が顕著に増加していた。また、酵素消化の結果、DS様構造CS様構造と別々の糖鎖として存在しているのではなく、両者が同一の糖鎖にハイブリッドとして合成されていることが判明した。胎児のこの試料では、強い神経突起伸長促進活性が観察されたが、成体の試料では非常に弱い活性しか見られなかった。また、胎児の試料のこの活性は、GalNAc-グルクロン酸の結合を特異的に切断するコンドロイチナーゼAC-lによってもGalNAc-イズロン酸の結合を特異的に切断するコンドロイチナーゼBによっても消失したので、グルクロン酸もイズロン酸のハイブリッド構造が重要であることが分かった。また、胎児の試料は、プライオトロフィン、ミッドカイン、FGF-2、FGF-10、FGF-18などの種々の増殖因子と、成体の試料と比較して格段に高い結合能を有し、しかも強い親和性で相互作用することが分かった。それらの結合はコンドロイチナーゼBで消失するので、イズロン酸を含むドメインが深く関わっていることが明らかになった。

The structure and activity of the compound are analyzed by chemical analysis. Molecular weight: 40kDa, disaccharide composition: 40kDa, disaccharide acid content: 40 kDa, disaccharide composition: 40 kDa. For adult samples, less than 1% of the total acid is present, for fetal samples, 8 ~ 9% is present, for adult samples, CS is present, for fetal samples, DS is present, and for fetal samples, DS is present. The results of enzyme digestion, DS structure, CS structure, and sugar chain exist, and the results of enzyme digestion, DS structure, CS structure, and sugar chain synthesis are identified. The fetal samples showed strong neurite elongation promoting activity, while the adult samples showed very weak activity. The activity of the sample is related to the specific cleavage of GalNAc-3-carboxylic acid binding. The specific cleavage of GalNAc-3-carboxylic acid binding is related to the structural importance of GalNAc-3-carboxylic acid binding. The growth factors of FGF2, FGF-10, FGF-18, FGF3, FGF4, FGF5, FGF6, FGF7, FGF8, FGF9, FGF9, FGF9, All the above are related to the structure and structure of the structure.