筋由来の運動神経細胞死誘導因子の同定

肌源性运动神经元死亡诱导因子的鉴定

• 批准号: 11878168
• 负责人: 樫原 康博
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Okazaki National Research Institutes
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1999
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1999 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-11878168/
• 关键词: 運動神経細胞; 自然細胞死; アポトーシス; cDNAクローニング; アフリカツメガエル; 鶏胚; 筋; 細胞死誘導

胎生期の運動神経細胞は、約半数が自然死(アポトーシス)する。この自然細胞死は、古くより仮定されている運動神経細胞に対する生存促進因子と共に、未だ知られていない筋由来の細胞死誘導因子により制御されている可能性が示唆されている。本研究は、この同定されていない筋由来の運動神経細胞死誘導因子のcDNAクローニングを目的とした。この目的のために、すでに作成している運動神経細胞自然死期の鶏胚下肢筋mRNA由来のcDNAライブラリーを分画し、この分画cDNAを用いて合成したcRNAをアフリカツメガエル卵母細胞に注入することで得られる翻訳分泌蛋白を培養運動神経細胞に投与し、投与後、その生存率を指標にして細胞死活性蛋白遺伝子を有する分画をスクリーニングした。次に、この活性のある分画を、同様の方法でさらに細分画するという操作を繰り返し、最終的に、細胞死活性を有する蛋白をコードするcDNAを含む11種の単一のプラスミドcDNAプールを得た。そこで、この11種類のcDNA各々を、シークエンスし、ホモロジー検索を実施したところ、5種類の既知の蛋白と6種類の未知蛋白をコードする遺伝子が存在すると示唆された。目的の細胞死誘導蛋白遺伝子は、この6種類の未知蛋白遺伝子のなかのひとつと考えられる。従って、現在、この6種類のプラスミドcDNA各々について上記の方法によって、運動神経細胞死活性を有する蛋白をコードする単一cDNAの決定を試みている。

About half of the fetal motor neurons die naturally. This natural cell death is regulated by the presence of survival-promoting factors in motor neurons, and the presence of cell death-inducing factors in motor neurons is not yet known. This study aimed to identify the origin of the cDNA sequence of the motor neuron death-inducing factor. The purpose of this study is to establish a cDNA sequence for the origin of embryonic muscle mRNA in the natural death of motor neurons and to synthesize cRNA for oocyte injection. In the second step, the activity of the protein is divided into two parts, and the same method is used to divide the protein into two parts. The final part is the protein of the cell. The cDNA of the protein contains 11 kinds and one kind. There are 11 types of cDNA, 5 types of known proteins and 6 types of unknown proteins. Objective: To investigate 6 kinds of unknown proteins in cell death-inducing protein. The six types of cDNA were tested for the determination of protein and cDNA in vivo and in vivo.