翻訳制御への関与が期待される新規GTP結合タンパク質GSPT/eRF3の機能解析

GSPT/eRF3（一种有望参与翻译控制的新型 GTP 结合蛋白）的功能分析

• 批准号: 00J09549
• 负责人: 小林 哲夫
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-00J09549/
• 关键词: 翻訳終結; GTP結合タンパク質; mRNA分解; グアニンヌクレオチド

真核生物における翻訳終結因子GSPT/eRF3は、C末端側領域に翻訳伸長因子EF1αに類似のGTP結合ドメインをもつGTP結合タンパク質である。GSPTは、翻訳終結因子eRF1と結合し翻訳終結反応を制御することが知られているが、mRNA 3'末端poly(A)尾部に結合するpoly(A)-binding protein(PABP)やNMD(Nonsense mediated mRNA decay)に関与するUpflpと相互作用しmRNAの分解過程も制御することが明らかになりつつある。私はこれまでに、出芽酵母においてGSPTとeRF1、GSPTとPABPが結合することをin vitro結合実験及び免疫共沈実験で示した。さらに私は、GSPTとeRF1の結合がGSPTのグアニンヌクレオチド型で制御されること(GTP型で結合し、GDP型で乖離する)、及びGSPTとPABPの結合はGSPTのグアニンヌクレオチド型非依存的であることを示した。本年度は、以上を踏まえて実験を行い、以下に記す知見を得た。1)出芽酵母におけるGSPTとUpflpの結合は、GSPTのグアニンヌクレオチド型非依存的であった。2)野生型及びGTP結合ドメイン変異型GSPTを形質転換した出芽酵母株を作製し、その株における翻訳終結反応を検討した結果、GTP結合ドメイン変異型GSPT発現株において翻訳終結反応の異常が見られた。3)上記の株を用いてmRNA分解を検討した結果、PABPとの結合を介して制御される通常のmRNA分解経路、Upflpとの結合を介して制御されるNMD経路共にGTP結合ドメイン変異型GSPT発現株において異常が見られた。以上の結果から、GSPTはそのグアニンヌクレオチド型の変換により翻訳終結反応と2つのmRNA分解経路を制御していることが明らかとなった。

In eukaryotes, the GSPT/eRF3 factor and the C-terminal domain elongation factor EF1 α are similar to those of the combination of GTP and GTP. GSPT (A)-binding protein (PABP)-NMD (Nonsense mediated mRNA decay)-the interaction between the poly (A)-binding protein (PABP) NMD (Nonsense mediated mRNA decay) and the interaction between the poly (A) and the Upflp interaction. the mRNA decomposition process is used to control the decomposition process of the mRNA. GSPT eRF1, GSPT PABP, in vitro, immunoprecipitation and immunoprecipitation were detected. The combination of GSPT, GSPT, eRF1, and GTP (GTP, GDP), and GSPT PABP, in combination with GSPT, has been shown to be independent of each other. In the current year and above, you will have a good performance, and the following notes will help you. 1) yeast sprouting, GSPT, Upflp, GSPT, yeast, yeast. 2) the wild type and GTP combined with the wild type and the wild type of GSPT were used as yeast strains, and the yeast strains were used as the results. The results of the results were compared with that of the wild type and the wild type GSPT strains. The results showed that the yeast strains of the wild type and the wild type were used as the results, and the results of the GTP combined with the wild type and the wild type were used. 3) the results of mRNA analysis were used in this study. The results showed that the normal mRNA decomposition pathway was controlled by the combination of PABPP and GTP, and the GTP was combined with the control of GSPT by the combination of GTP. The results of the above results show that the GSPT system is responsible for improving the performance of the mRNA decomposition system.