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オーガナイザー特異的転写因子Xlim-1の機能ドメインの解析

组织者特异性转录因子Xlim-1的功能域分析

基本信息

批准号：
12028208
负责人：
平良眞規
金额：
$ 1.02万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

LIMホメオドメイン蛋白質Xlim-1はアフリカツメガエルのシュペーマン・オーガナイザー領域に特異的に発現する。LIMドメイン変異体の活性型Xlim-1を異所発現させると神経誘導などのオーガナイザー活性を現わす。そこで、Xlim-1のオーガナイザーにおける役割がどの機能ドメインによって担われているのかを明らかにすることを目的とし、C末領域の機能解析を行った。Xlim-1のパラログ遺伝子Xlim-5との比較により、C末領域を5つの保存領域CCR(C-terminal conserved region)1から5に分けそれぞれの役割を解析した。CCR1あるいはCCR2の欠失体を腹側帯域で高発現(mRNA量で1ng/embryo)させると単独で2次軸形成能が現れることを見い出した。この活性はLIMドメインの変異体の活性と類似していることより、CCR1からCCR2にかけての領域がXlim-1の活性を負に制御していることが示唆された。次にXlim-1の活性化共役因子Ldb1との共発現の系で検討したところ、CCR2とCCR4の領域が2次軸形成能に必要な領域であることが明かとなった。特にCCR2を欠失させるとほとんど活性が消失したことより、CCR2が主要な転写活性化ドメインであり、CCR4がそれに対して補助的に働くことが予想された。CCR2の進化上保存された5つのチロシンをアラニンに置換してたところ活性が完全に消失したことより、これらのチロシンは転写活性化補助因子(co-activator)との相互作用に必須であることを示唆している。しかし既知の転写活性化補助因子であるCBP,SRC-1,TIF2との結合は認められたかったこと、および転写活性化に不可欠なチロシンの存在は、我々の知る限りにおいて報告例がないことより、新規な転写活性化ドメインであると予想している。今後はこれらの領域と相互作用する蛋白質を同定することで、オーガナイザーにおけるXlim-1の活性化機構が明らかになると期待される。

LIMホメオドメインproteinXlim-1はアフリカツメガエThe unique に発成する in the field of ルのシュペーマン・オーガナイザー. LIMドメイン変 allogeneic active typeそこで, The purpose of the project is the purpose of the project, and the function analysis of the C-end field is the performance of the project. Xlim-1のパラログ缝子CCR1 and CCR2 are both high in the ventral region and high in the ventral region (mRNA amount is 1ng/embryo), and the secondary axis formation ability is low.このactiveはLIMドメインの変variantのactiveとsimilar to していることより、CCR1からC CR2 is active in the field of Xlim-1 and is negative in control. The active co-factor Ldb1 of Xlim-1 and the co-activating co-factor Ldb1, C The secondary axis of the field of CR2 and CCR4 is the necessary field to form the energy. The special function of CCR2 is to lose its activity and disappear, and the main function of CCR2 is to disappear. I wrote the activation code and the CCR4 code subsidy for the story. CCR2's evolution has been preserved and its activity has completely disappeared.らのチロシンは転Write activation auxiliary factor (co-activator) and とのinteraction must be done であることをshows している.しかしKnown の転activation auxiliary factors であるCBP, SRC-1, TIF2 and とのcombination は cognition められたかったこと、および転activation にI can’t owe you the existence of the なチロシンのは、我々のknowるlimitりにおいてreport exampleがないことより, Shingui な転WRITING ACTIVATING ドメインであると月思している. In the future, the field of interaction, protein, and protein will be determined together.イザーにおけるThe activation mechanism of