权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

オーガナイザーにおけるLIMホメオドメイン蛋白質Xlim-1の標的遺伝子の解析

组织器中LIM同源域蛋白Xlim-1的靶基因分析

基本信息

批准号：
11152207
负责人：
平良眞規
金额：
$ 0.7万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

アフリカツメガエルのオーガナイザーに発現するLIMホメオドメイン蛋白質Xlim-1は転写因子として働きオーガナイザーの前方型神経組織の誘導に関与していることが示唆されている。したがってXlim-1の標的遺伝子を明らかにすることはオーガナイザー活性を担う分子カスケードの一端を明らかにする上で非常に重要である。本研究では、Xlim-1の標的遺伝子候補の検索と、またその過程で見い出されたcerberus遺伝子のプロモーター解析を行った。(1)サブトラクション・ライブラリーを用いたXlim-1標的遺伝子候補の検索:活性型Xlim-1を発現させたアニマル・キャップを用いてサブトラクション・ライブラリーを作成し検索したところ10種の遺伝子を得た。全胚in situハイブリダイゼーションで発現領域を検討した結果、5つ遺伝子がオーガナイザー領域に発現し、その中に頭部誘導因子Cerberusの遺伝子が含まれていた。(2)cerberus遺伝子のプロモーター解析:cerberusのゲノム遺伝子プロモーター領域を単離しpGL3-basicベクターに組み込み、ルシフェラーゼ遺伝子をレポーターとしたレポーター・コンストラクトcer/Lucを作成した。cer/Lucと活性型Xlim-1 mRNAをアフリカツメガエル2細胞期の動物極側に顕微注入し、胞胚期でアニマル・キャップを切除し、原腸胚期でルシフェラーゼ活性を測定した。その結果、(i)活性型Xlim-1により強く活性化されること、(ii)反応領域は0.58kbで十分であること、(iii)その領域にXlim-1の結合配列である多数のTAATコアモチーフが存在すること、(iv)-0.22から-0.12を欠失すると反応性が消失すること、が明かとなった。これらの結果はcerberusがXlim-1の直接の標的遺伝子であること、およびXlim-1のオーガナイザー機能への関与の少なくとも一部はcerberusの発現を介していることを示唆している。

Do you want to know that you need to know that you have LIM problems? you need to know that the protein Xlim-1 is a factor. You need to know that you are in front of the divine organization. The mother of the Xlim-1 is very important to know that it is very important to carry the active molecule. In the course of this study, the candidates of the Xlim-1 hospital, and the candidates of the Xlim-1 program, were asked to analyze the data in the cerberus database. (1) to make sure that you can use the sub-waiting line of the Xlim-1 system: the active Xlim-1 system is used to improve the quality of the product. The system is used to improve the quality of the product. The results of the whole-embryo in situ system were detected, the results of the field tests were obtained, the results of the field tests were detected, and the Cerberus guidance factors were detected in the whole embryo. (2) the analysis of the cerberus information system: the Cerberus.It is important to know that the field is different. The pGL3-basic system is located in the field. The system is divided into two parts: one is the computer, the other is the cer/Luc. Cer/Luc: active Xlim-1 mRNA, microinjection, microinjection, blastocyst, embryo, embryo and embryo. The results are as follows: (I) active Xlim-1, (I) active TAAT, (iii), (active), (iii), and (iii). The results show that cerberusXlim-1 is directly responsible for the application of the computer, the Xlim-1, the machine, and the cerberus.