ヒト21番染色体を保持するダウン症候群モデルマウスの作出とその原因遺伝子同定

携带人类21号染色体的唐氏综合症模型小鼠的制作及其致病基因的鉴定

• 批准号: 12204077
• 负责人: 押村 光雄
• 金额: --
• 依托单位: Tottori University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12204077/
• 关键词: ダウン症; モデルマウス; ヒト21番染色体; 行動異常; 心奇形; 遺伝子発現; 組織特異性

ヒト正常線維芽細胞由来で優性選択マーカー(pSTneo)により標識されたhChr.21を保持するマウスA9細胞を作製し、微小核細胞融合法によりhChr.21をマウスES細胞(TT2F)へ移入した。次にhChr.21を保持するES細胞からキメラマウスを作出し、FISH法により導入hChr.21の保持率を調べた。導入hChr.21は各組織において高率に、特に脳ではほぼ100%保持されていた。また、キメラマウス組織におけるhChr.21上の遺伝子の発現は、ヒトと同様の組織特異的な様式を維持していた。キメラマウス胎児において心奇形が高頻度に観察されたことに加え、In vitroにおいてもES細胞の心筋への分化の遅れが認められた。キメラマウスの行動解析を行った結果、導入hChr.21の保持率と相関して行動異常が観察された。次いでhChr.21を保持するES細胞と野生型ES細胞より作出したキメラマウスの組織から得たタンパク質を二次元電気泳動により展開し、hChr.21の移入によって量的、質的に発現の変化する遺伝子を検索した。はじめに脳海馬について検討した結果、ヒト染色体導入キメラマウスにおいてヒト21番染色体上からSOD1遺伝子の発現が検出され、この方法がタンパク質レベルで遺伝子発現の差異を同定するのに有効であることが示された。さらに心筋について検討したところ、ヒト21番染色体導入キメラで2種のタンパク質の発現低下が認められた。現在これらのタンパク質の同定を行っている。

ヒ ト normal line d bud cell origin で prepotency sentaku マ ー カ ー (pSTneo) に よ り logo さ れ た hChr. 21 を keep す る マ ウ ス A9 cells を as し, tiny nuclear fusion method に よ り hChr. 21 を マ ウ ス ES cells (TT2F) へ move し た. Time に hChr. 21 を keep す る ES cells か ら キ メ ラ マ ウ ス を make し, FISH に よ り import hChr. 21 の retention を adjustable べ た. The high rate of に and the special rate of に脳で に脳で ほぼ ほぼ of hChr.21 て in each organization was maintained at 100% されて た た. ま た, キ メ ラ マ ウ ス organization に お け る hChr. の on 21 heritage 伝 son の 発 は, ヒ ト と with others の tissue specific な others type を maintain し て い た. キ メ ラ マ ウ ス tire where に お い て heart, form が high frequency に 観 examine さ れ た こ と に え, the In vitro に お い て も ES cells の heart muscle へ の differentiation の 遅 れ が recognize め ら れ た. Youdaoplaceholder0, ウス, ウス, <s:1> action analysis を line った results, import hChr.21 と retention rate と related て action anomalies が観 detection された. Time い で hChr. 21 を keep す る ES cells と wild-type ES cells よ り make し た キ メ ラ マ ウ ス の organization か ら have た タ ン パ ク qualitative を secondary yuan electric 気 swimming に よ り し and hChr. 21 の move に よ っ て quantity and qualitative に 発 の now - the す る heritage 伝 son を 検 cable し た. は じ め に 脳 hippocampal に つ い て beg し 検 た results, ヒ ト chromosome import キ メ ラ マ ウ ス に お い て ヒ ト 21 times on chromosome か ら SOD1 posthumous son 伝 の 発 now が 検 out さ れ, こ の way が タ ン パ ク qualitative レ ベ ル で posthumous son 伝 発 を is の differences with fixed す る の に have sharper で あ る こ と が shown さ れ た. さ ら に heart muscle に つ い て beg し 検 た と こ ろ, ヒ ト's chromosome 21 import キ メ ラ で two の タ ン パ ク qualitative の 発 now low が recognize め ら れ た. Now パ れら タ タ パ パ the duroid <s:1> is set in を row って る る る.

项目成果

Shinohara T., et al.: "Mice containing a human chrmosome 21 model behavioral impairment and cardiac anomalies of Down syndrome"Hum.Mol.Genet.. (in press).

Shinohara T. 等人：“含有人类 21 号染色体的小鼠模型行为障碍和唐氏综合症心脏异常”Hum.Mol.Genet..（出版中）。

Shinohara,T., et al.: "Stability of human chromosome fragments in cultured cells and in mice"Chrom.Res.. 8. 713-725 (2000)

Shinohara,T., et al.：“培养细胞和小鼠中人类染色体片段的稳定性”Chrom.Res.. 8. 713-725 (2000)

Inoue,T., et al.: "Specific impairment of cardiogenesis in mouse ES cells containing a human chromosome 21"Biochem.Biophis.Res.Commun.. 273. 219-224 (2000)

Inoue,T., et al.：“含有人类 21 号染色体的小鼠 ES 细胞中心脏发生的特异性损伤”Biochem.Biophis.Res.Commun.. 273. 219-224 (2000)