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特定染色体導入によるがん抑制遺伝子の同定

通过引入特定染色体鉴定抑癌基因

基本信息

批准号：
05152084
负责人：
押村光雄
金额：
$ 6.4万
依托单位：
Tottori University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Cancer Research
财政年份：
1993
资助国家：
日本
起止时间：
1993 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

マウスDT細胞の軟寒天内増殖は正常ヒト1番染色体移入により抑制される。さらに,ヒト1番染色体移入DT細胞から希に出現する軟寒天内増殖クローンについて,ヒト1番染色体上の共通欠失領域の同定を行ったところ,1q21あるいは1q23-q25領域にこの抑制にかかわる遺伝子の存在が推定され,この領域から1つの候補遺伝子YLの単離に成功した。そこで,DT細胞の軟寒天内コロニー出現頻度を指標にして,遺伝子導入によるヒトYL遺伝子の抑制効果について検討した。サイトメガロウイルス発現ベクター(pRc/CMV)にYLcDNAをセンスあるいはアンチセンス方向に連結したプラスミド(pCMV-YL,pCMV-YLR)を作製し,それぞれDT細胞に導入した。導入細胞の軟寒天内増殖およびその発現等について検索した結果,pCMV-YL導入DT細胞(YL-DT)においてのみ軟寒定内コロニー出現頻度の低下が認められた。さらに,YL-DT細胞由来の軟寒天内増殖クローンの解析を行ったところ,neo遺伝子を含む発現プラスミドの消失,あるいは発現プラスミドを保持したままでのヒトYLcDNA発現の著しい低下が認められた。pCMV-YLR導入DT細胞(YLR-DT)由来の軟寒天内増殖クローンの解析では,導入した発現プラスミドの存在が確認された。これらのことから,ヒトYL遺伝子はDT細胞の軟寒天内増殖を抑制する効果をもつことが強く示唆された。他方,YLcDNAの予測されるアミノ酸配列は多くの転写因子にみられる特徴をもっており,大腸菌において産生させたYL蛋白には強いDNA結合能が認められたことからも,YL蛋白が他の遺伝子群の転写調節を介して機能している可能性が考えられ,標的遺伝子の同定等を含め今後の検討が期待される。

The proliferation of DT cells in soft and cold weather is inhibited by normal chromosome translocation. In addition, chromosome 1 was transferred into DT cells and expected to appear in soft and cold weather. The common deletion domain on chromosome 1 was identified and identified. The suppression domain was presumed to exist in chromosome 1-q23-q25 domain, and the candidate gene YL was successfully isolated in chromosome 1-q25 domain. In this paper,DT cells in the soft cold days of the frequency of the occurrence of indicators, gene introduction, gene inhibition effect of the study. The YLcDNA sequence is linked to the pCMV-YL (pCMV-YLR) sequence in the same direction as the pRc/CMV sequence. As a result,pCMV-YL was introduced into DT cells (YL-DT), and the frequency of expression of pCMV-YL in DT cells decreased. In addition, the analysis of YL-DT cell origin in the soft cold environment, including the disappearance of neo gene expression, the disappearance of gene expression, and the maintenance of gene expression in the soft cold environment. Analysis of the origin of pCMV-YLR introduced DT cells (YLR-DT) in soft weather and confirmation of the presence of pCMV-YLR introduced DT cells The results of this study show that the growth of DT cells in soft tissue is inhibited by the presence of YL gene. In addition, YL cDNA is predicted to be encoded by multiple transcription factors, including characteristics, production of YL protein by E. coli, strong DNA binding ability, and function of YL protein as a mediator of transcription regulation by other gene subgroups.