腫瘤形成能を有する急性骨髄性白血病細胞における局所浸潤・増殖機構の解明

阐明具有成瘤能力的急性髓系白血病细胞的局部侵袭和增殖机制

• 批准号: 12215011
• 负责人: 大橋 芳之
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215011/
• 关键词: 急性骨髄性白血病; 接着分子; インテグリン; ヒアルロン酸

骨髄異形成症候群から急性骨髄性白血病に進展した患者末梢血芽球より線維芽細胞上で増殖する白血病細胞株(M-IKO)を樹立し、M-IKOの接着依存性増殖の機構について解析を行なった。96ウェルプレート上で培養された線維芽細胞Balb3T3を放射線照射し、増殖を停止させた後にM-IKOをBalb3T3上でそれぞれの日数共培養し、トリチウムチミジンを培養の最終4時間加えその放射活性を測定しM-IKOの増殖活性を評価した。M-IKOは線維芽細胞Balb3T3存在下で培養3日目、5日目、7日目と培養日数と共に増殖し続けたが、線維芽細胞非存在下では培養5日目にはほとんど死滅した。線維芽細胞の培養上清のみではM-IKOは増殖せず、その増殖に線維芽細胞との直接の接着が重要な役割を果たしていることが示唆された。M-IKOに発現されている接着分子としてベータ1およびベータ2インテグリンが確認されたが、次にそれぞれの分子について単クローン抗体を用いて、各抗体存在下M-IKO増殖に及ぼす影響について調べた。その結果、抗ベータ1インテグリン抗体と抗ベータ2インテグリン抗体の単独あるいはそれぞれの抗体の混合でも有意な増殖阻害効果は認められず、両分子の関与は否定的であった。最後にM-IKOの線維芽細胞依存性増殖の反応系に種々の細胞外基質を加え、増殖に及ぼす影響を調べた。その結果、ヒアルロン酸添加時に10μg/mlでは23%、50μg/mlでは52.7%と用量依存的に増殖抑制が認められた。このことからヒアルロン酸-CD44反応系がM-IKOの接着依存性増殖に関与している可能性が考えられた。

Leukemia cell lines (M-IKO) were established and analyzed for the mechanism of M-IKO's subsequent dependent proliferation during the progression of osteogenesis syndrome from acute osteoblastic leukemia to peripheral blood blasts from patients. The number of days of co-culture of M-IKO on Balb 3 T3 after radiation irradiation and cessation of proliferation was determined by measuring the radioactivity of M-IKO at the end of 4-hour culture and evaluating the proliferation activity of M-IKO. M-IKO cells were cultured for 3, 5, and 7 days in the presence of Balb 3T3, and cultured for 5 days in the absence of Balb 3T3. M-IKO proliferation in culture supernatant of line bud cells and direct growth of line bud cells are important for production. M-IKO was detected in the presence of the following molecules: 1 and 2. It was confirmed that M-IKO was detected in the presence of the following molecules: 1 and 2. It was confirmed that M-IKO was detected in the presence of the following molecules: 1 and 2. It was confirmed that M-IKO was detected in the presence of antibodies. Results: Anti-virus antibody and anti-virus antibody were mixed together to intentionally increase the reproduction inhibition effect. Finally, M-IKO's cell-dependent proliferation was mediated by extracellular matrix enhancement, proliferation, and proliferation. The results showed that the dose-dependent growth inhibition was 23%, 50μg/ml and 10μg/ml respectively. This paper discusses the possibility of M-IKO's adhesion dependence on CD44.

项目成果

Iwata S,Ohashi Y,Kamiguchi K,Morimoto C: "Beta 1-integrin-mediated cell signaling in T lymphocytes."J Dermatological Science. 23. 75-86 (2000)

Iwata S、Ohashi Y、Kamiguchi K、Morimoto C：“T 淋巴细胞中 Beta 1-整合素介导的细胞信号传导。”J Dermatological Science。

Sasahara Y,Kawai S,Kumaki S,Ohashi Y,Minegishi M, et al: "Novel mutations, no detectable mRNA and familial genetic analysis of the Wiskott-Aldrich syndrome protein gene in six Japanese"European Journal of Pediatrics. 159. 23-30 (2000)

Sasahara Y、Kawai S、Kumaki S、Ohashi Y、Minegishi M 等人：“6 个日本人 Wiskott-Aldrich 综合征蛋白基因的新突变、未检测到 mRNA 和家族遗传分析”《欧洲儿科杂志》。