セントロメアタンパク質ZW10の細胞周期制御機構およびがん細胞における変異の解析

着丝粒蛋白ZW10细胞周期调控机制及癌细胞突变分析

• 批准号: 12215153
• 负责人: 深川 竜郎
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12215153/
• 关键词: がん化; 染色体不安定性; Bub; セントロメア; DT40細胞; ZW10; 紡錘体チェックポイント; Mad

染色体が安定に次世代細胞へと受け継がれていくことは、生物にとって最も基本的な性質である。染色体分配機構に狂いが生じると、染色体の異数化、がん化など生物に対して重大な悪影響が生じる。染色体の不安定性に関する基礎知見はがんの生物学的特性を理解する上で重要である。我々はがん化と染色体不安定性の関係を理解するために、新規セントロメアタンパク質ZW10の機能解析を行っている。ZW10はショウジョウバエで染色体不安定性を引き起こす変異体の原因遺伝子として単離され、M期にセントロメアに局在することが知られている。また、変異体の姉妹染色分体は微小管の重合阻害剤であるコルセミドの処理により分離してしまうことから、チェックポイントタンパク質の可能性も示唆されている。しかしながら、ショウジョウバエの変異体は蛹で致死となるため、詳細な細胞遺伝学的な研究は遅れている。本年度の研究において、テトラサイクリン(TET)の遺伝子発現制御システムを応用してZW10の条件的ノックアウトDT40細胞株を作成した。作成した条件的ノックアウト株は3アリルから成るすべての野生型のZW10遺伝子座を薬剤耐性遺伝子が置換され、TETで発現が制御されるプロモーターの下流につないだZW10cDNA遺伝子のみを保持している。従って、TETの添加によりZW10の発現を条件的にコントロールできる。本株にTETを加えてZW10の発現を抑え、なおかつ微小管の重合阻害剤であるコルセミドを添加すると細胞周期が進行した。この結果はZW10が紡錘体のチェックポイントタンパク質であることを強く示唆している。現在、ノックアウト株における染色体の不安定性とZW10とMadやBubファミリータンパク質との関係について解析している。

Chromosome が settle に nextgen cells へ と by け 継 が れ て い く こ と は, biological に と っ て the basic nature of な で も あ る. Chromosome assigned に crazy い が raw じ る と, chromosome の anomaly, が ん change な ど biological に し seaborne て major な 悪 influence が raw じ る. Chromosome chromosomal instability に is related to する basic knowledge する がん がん <s:1> biological characteristics を understanding する で important である. I 々 は が ん change と chromosome labile の masato is を understand す る た め に, new rules セ ン ト ロ メ ア タ ン パ ク qualitative ZW10 の line function analytical を っ て い る. ZW10 は シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ で chromosome labile を lead き up こ す - cause of allograft の survived 伝 と し て 単 from さ れ, M phase に セ ン ト ロ メ ア に bureau in す る こ と が know ら れ て い る. ま た, - variant の and sisters chromatid は の overlap tiny tube resistance against tonic で あ る コ ル セ ミ ド の 処 Richard に よ り separation し て し ま う こ と か ら, チ ェ ッ ク ポ イ ン ト タ ン パ ク qualitative possibility の も in stopping さ れ て い る. し か し な が ら, シ ョ ウ ジ ョ ウ バ エ の - variant は pupa death で と な る た め, detailed study な cells but 伝 learn な は 遅 れ て い る. This annual の study に お い て, テ ト ラ サ イ ク リ ン (TET) の heritage 伝 son 発 now suppression シ ス テ ム を 応 with し て ZW10 の conditions ノ ッ ク ア ウ ト DT40 cell lines を made し た. Consummate し た conditions ノ ッ ク ア ウ ト は 3 ア リ ル か ら into る す べ て の wild-type の ZW10 heritage 伝 stroma を 薬 tonic patience heritage 伝 son が replacement さ れ, TET で 発 now が suppression さ れ る プ ロ モ ー タ ー の obscene に つ な い だ ZW10cDNA heritage 伝 son の み を keep し て い る. Youdaoplaceholder0, TET <s:1> add によ によ ZW10 <s:1> to the を occurrence condition にコ にコ トロ トロ で で で で る る. This plant に TET を plus え て ZW10 の 発 を え suppression, な お か つ tiny tube の reclosing resistance against tonic で あ る コ ル セ ミ ド を add す る と cell cycle が し た. こ の results は ZW10 が spindle の チ ェ ッ ク ポ イ ン ト タ ン パ ク qualitative で あ る こ と を く and shown strong sucking し て い る. Now, ノ ッ ク ア ウ ト strains に お け る chromosome の labile と ZW10 と Mad や Bub フ ァ ミ リ ー タ ン パ ク qualitative と の masato is に つ い て parsing し て い る.

项目成果

野上正弘: "Relative locations of the centromere and imprinted SNRPN gene within chromosome 15 territories during the cell cycle in HL60 cells"Journal of Cell Science. 113. 2157-2165 (2000)

Masahiro Nogami：“HL60 细胞细胞周期中 15 号染色体区域内着丝粒和印记 SNRPN 基因的相对位置”《细胞科学杂志》113. 2157-2165 (2000)。

中村保一: "Codon usage tabulated from international DNA sequence databases : status for the year 2000."Nucleic Acids Research. 28. 292 (2000)

Yasuichi Nakamura：“根据国际 DNA 序列数据库列出的密码子使用情况：2000 年的状况。”《核酸研究》28. 292 (2000)。

野上正弘: "Intranuclear arrangement of human chromosome 12 correlates to large-scale replication domains"Chromosoma. 108. 514-522 (2000)

Masahiro Nogami：“人类 12 号染色体的核内排列与大规模复制域相关”Chromosoma。108. 514-522 (2000)

渡辺良久: "Replication timing of the human X-inactivation center (XIC) region : correlation with chromosome bands."Gene. 252. 163-172 (2000)

Yoshihisa Watanabe：“人类 X 失活中心 (XIC) 区域的复制时间：与染色体带的相关性。”Gene. 252. 163-172 (2000)

岡村淳: "Gene structure, chromosomal localization and immunolocalization of chicken centromere proteins CENP-C and ZW10."Gene. 262. 283-290 (2001)

Jun Okamura：“鸡着丝粒蛋白 CENP-C 和 ZW10 的基因结构、染色体定位和免疫定位。”Gene. 262. 283-290 (2001)