ヒスタミン・トランスポーターは、存在するか?ヒスタミン合成酵素KOマウスを用いた研究

是否存在使用组胺合酶 KO 小鼠进行的组胺转运蛋白研究？

基本信息

批准号：
12877015
负责人：
渡邉建彦
金额：
$ 1.28万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ヒスタミントランスポーターの存在は、まだ、確立していない。ヒスタミンの合成酵素であるヒスチジン脱炭酸酵素(HDC)遺伝子ノックアウト(KO)マウスの組織では、HDC活性は検出できなかったが、組織のヒスタミン含量を測定すると、ゼロではなく野生型のそれの5〜10%存在していた。HDC-KOマウスを低ヒスタミン食で飼育し、皮膚のヒスタミン含量を測定したところ、2.26+0.06nmol/gであったが、高ヒスタミン食で7日間飼育すると10.53+0.65にまで上昇し、低ヒスタミン食に戻すと4日後、3.9+0.5になった。血漿中のヒスタミン含量は、それぞれ、0.04+0.01 11.3+1.25、11.3+1.25、0.16+0.01nmol/mlであった。この結果は、ヒスタミンは血中から皮膚の肥満細胞に取り込まれている、即ち、ヒスタミン・トランスポーターが存在することを示唆した。これを確かめるために、HDC-KOマウス及び野生型マウスの大腿骨から骨髄細胞をとり、IL3存在下に培養してBMMCを調整し、検討した。BMMCを[^3H]ヒスタミン存在下にインキュベートしたところ温度依存的、濃度依存的な[^3H]ヒスタミンの取り込みが認めら、Rosenthal-Scatchard解析からヒスタミンの取り込み機構には、低親和性と高親和性の2つが存在することが示唆された。また、この取り込みはコールドヒスタミン存在下で濃度依存的に阻害された。取り込まれたヒスタミンは、IgEを介する脱顆粒反応によって放出されること、また、ヒスタミンを取り込ませたBMMCを細胞分画すると、ヒスタミンは分泌顆粒の分画に一致して検出されることから、ヒスタミンは細胞に取り込まれた後、顆粒中に局在していることが示された。さらに、このヒスタミンの取り込みに対する、種々のトランスポーター阻害薬、ヒスタミン受容体拮抗薬の影響を調べたところ、既存の物質でヒスタミンの取り込みを阻害するものはなかった。

组胺转运蛋白的存在尚未建立。在组氨酸脱羧酶（HDC）基因敲除（KO）小鼠的组织中，组胺合酶未检测到HDC活性，但是当测量组织组胺含量时，它以野生型的5-10％而不是零。在低组胺饮食中饲养了HDC-KO小鼠，并测量了皮肤组胺含量，发现它的含量为2.26 + 0.06 nmol/g，但是当它们保持高组胺饮食7天7天时，小鼠上升到10.53 + 0.65，并且在低组胺饮食中恢复到低组胺饮食时，它们恢复了4天的3.9 + 3.9 + 3.9 + 3.9 + 3.9 + 3.9 + 4天。血浆组胺含量分别为0.04+0.01 11.3+1.25、11.3+1.25和0.16+0.01 nmol/ml。结果表明，组胺是由血液（即组胺转运蛋白）从皮肤的肥大细胞中吸收的。为了证实这一点，从HDC-KO小鼠和野生型小鼠的股骨中取走骨髓细胞，并在IL3存在下培养以制备BMMC进行检查。当在[^3H]组胺的存在下孵育BMMC时，温度依赖性和浓度依赖于[^3H]组胺的摄取时，Rosenthal-Scatchard分析表明，有两种类型的组胺摄取机制：低亲和力和高亲和力。在冷组胺存在下，这种摄取也以浓度依赖性方式抑制。掺入的组胺是通过IgE介导的脱粒反应释放的，当组胺通过BMMC的细胞分馏分馏时，组胺与分泌颗粒的分数相一致，表明组胺被细胞吸收后局部在颗粒中。此外，当我们研究各种转运蛋白抑制剂和组胺受体拮抗剂对组胺摄取的影响时，没有现有物质抑制组胺摄取。