ヒスタミン・システムに残された解決すべき分子薬理学的・臨床医学的課題

组胺系统尚待解决的分子药理学和临床医学问题

• 批准号: 17659158
• 负责人: 渡邉 建彦
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659158/
• 关键词: ヒスタミンH4受容体; マススペクトロメトリー; ERMファミリー蛋白質; 低分子量G蛋白質; マスト細胞; カルシニン; カルボキシ末端; ヒスタミントランスポーター; 統合失調症; 社会的隔離ストレス; 認知機能; ヒスタミンH1受容体欠損マウス; G蛋白質共役受容体; プロテオミクス

1.ヒスタミンH4受容体(H4R)のカルボキシ(C)末端に結合する蛋白質の同定マウスH4R・C末端をグルタチオンSトランスフェラーゼ(GST)融合蛋白質として大腸菌で発現させ、それをグルタチオンビーズに結合しアフィニティカラムを作製した。このカラムを用いてマウス骨髄由来マスト細胞(bone marrow derived mast cells, BMMC)の1% Triton X100可溶性画分をアフィニティ精製し、H4R・C末端結合蛋白質を溶出した。マススペクトロメトリーを用いて、結合蛋白質を解析した結果、ERM (ezrin/radixin/moesin)ファミリー蛋白質であるezrinとmoesin、また、低分子量G蛋白質であるrac1とrac2を同定した。ERMファミリーの蛋白質は、細胞膜蛋白質とアクチン細胞骨格とを繋ぎとめる役割を持っている。またracは、マスト細胞のケモタキシスにおいて、細胞骨格の再構築に重要な役割を持つことが知られる。H4Rは、ヒスタミンをアトラクタントとしたマスト細胞のケモタキシスを媒介する受容体として知られているので、これらの結果および知見は、今回同定された結合蛋白質が、H4Rを介するケモタキシスにおいて何らかの機能を持つことを強く推測させる。2.カルシニン(β-alanylhistamine)のヒスタミン受容体リガンドとしての評価我々は、カルシニンがヒスタミンH3受容体(H3R)のアンタゴニストとして働くことを報告している。多くのH3RのリガンドはH4Rにも作用することから、カルシニンのH4Rに対するリガンドとしての活1生を調べた。H4Rを発現させたHEK293細胞の膜標本を用いた[^3H]histamine結合実験では、カルシニンは濃度依存的に[^3H]histamineの結合を阻害した(Ki=58nM)。また、cAMP response element (CRE)の支配下にルシフェラーゼを繋いだレポータープラスミドを用いた機能解析では、R4R発現293細胞において、フォルスコリン刺激によるCRE活性の増加を、カルシニンは濃度依存的に抑制した(pEC_<50>=6.86,α=0.94)。この結果から、カルシニンはH4Rのフルアゴニストであることが示唆された。

1. The identity of the protein bound to the C terminal of the H4 receptor (H4R) is determined by the identification of the protein bound to the C terminal of the H4R receptor (GST) fusion protein. 1% Triton X100 soluble fraction was extracted from bone marrow derived mast cells (BMMC) and purified with H4R·C-terminal binding protein. The analysis results of binding protein, ERM (ezrin/radixin/moesin), low molecular weight G protein, rac1 and rac2 were determined. ERM protein, cell membrane protein, cell membrane protein, cell membrane In addition, it is important to know the structure of cell skeleton and the structure of cell skeleton H4R is a protein binding agent, and the function of H4R is strongly predicted. 2. Report on the recovery of the receptor H3 from β-alanyl histamine. Many H3R and H4R components are used to adjust the life cycle of H3R and H4R. H4R was detected in HEK293 cells and inhibited by [^3H]histamine binding in a concentration-dependent manner (Ki=58nM). R4R showed a concentration-dependent inhibition of CRE activity in 293 cells under the control of cAMP response element (CRE)(pEC_<50>=6.86,α=0.94). The results of this study are as follows:

项目成果

Blockage of histamine H1 receptor attenuates social isolation-induced disruption of prepulse inhibition: a study in H1 receptor gene knockout mice

• DOI: 10.1007/s00213-005-0203-4
• 发表时间: 2005-10
• 期刊: Psychopharmacology
• 影响因子: 3.4
• 作者: H. Dai;T. Okuda;E. Sakurai;Atsuo Kuramasu;Motohisa Kato;F. Jia;A. Jing Xu;K. Iinuma;Ikuro Sato;K. Yanai

Selective cognitive dysfunction in mice lacking histamine H1 and H2 receptors

• DOI: 10.1016/j.neures.2006.10.020
• 发表时间: 2007-02-01
• 期刊: NEUROSCIENCE RESEARCH
• 影响因子: 2.9
• 作者: Dai, Hongmei;Kaneko, Kenya;Yanai, Kazuhiko
• 通讯作者: Yanai, Kazuhiko

Effects of histamine H3 antagonists and donepezil on learning and mnemonic deficits induced by pentylenetetrazol kindling in weanling mice

• DOI: 10.1016/j.neuropharm.2005.09.017
• 发表时间: 2006-03-01
• 期刊: NEUROPHARMACOLOGY
• 影响因子: 4.7
• 作者: Jia, FY;Kato, M;Yanai, K
• 通讯作者: Yanai, K

Recent advances of molecular pharmacology on histamine system : Roles of C-terminal tails of histamine receptors

组胺系统分子药理学最新进展：组胺受体C末端尾部的作用

• 发表时间: 2006
• 期刊: Journal of Pharmacological Sciences 101・1
• 作者: Takashima;M.;Dai H;Kuramasu A
• 通讯作者: Kuramasu A

Evidence for the presence of histamine uptake into the synaptosomes of rat brain

大鼠大脑突触体中存在组胺摄取的证据

• 发表时间: 2006
• 期刊: Pharmacology 78・2
• 作者: Takashima;M.;Dai H;Kuramasu A;Sakurai E
• 通讯作者: Sakurai E