权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

共焦点レーザー顕微鏡を用いたミクログリアの成熟と機能発現に関する分子形態学的研究

使用共焦激光显微镜研究小胶质细胞成熟和功能表达的分子形态学

基本信息

批准号：
12877126
负责人：
吉岡博
金额：
$ 1.34万
依托单位：
Kyoto Prefectural University of Medicine
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
2000
资助国家：
日本
起止时间：
2000 至 2001
项目状态：
已结题

项目摘要

adultラットでは、actinのmodulatorとして知られるThymosinβ4(tβ4)に対するあたらしい抗体がmicrogliaを選択的に染めることを申請者らが既に確認している。昨年までにP0、P3、P11、P28、P60の正常Wister ratにおいてtβ4抗体を用い、新生仔ラットでも同様にmicrogliaのマーカーとして有用であることを確認し、その細胞密度変化を検討した。本年度には、さらにP7を加え、細胞数の比も含めて検討した。ラットをパラフォルムアルデヒド液にて潅流固定し、大脳前額断凍結切片を作成。抗体(anti-rat tβ4 rabbit IgG;1:15000;4℃、24hr)反応させ、免疫組織化学的に検討した。Parietal Cortexにおいて、皮質全層(All)と、Molecular layer(M)、Outer Cortex(Co)、Inner Cortex(Ci)毎にtβ4陽性細胞を数え、それぞれの部位における細胞密度、部位毎の細胞数の比をとり検討した。M部位については細胞と軟膜との接触についても調べた。さらにpropidium iodide染色による核分裂観察も共焦点顕微鏡にて行った。細胞密度はP0からP3には変化に乏しく、P3からP11にかけて増加したが、P7からP11で最も急激であった。P11からP60には細胞密度が低下した。部位毎の細胞数の比は各々の日齢ではP0、P3でM、CiがCoよりも大きく、不均一な分布であったが、P7ではCoの比が急激に上昇し均一な分布に近づき、この傾向はP11以降も続いた。すなわちP3とP7の間に著明な分布変化を認めた。また、M部位では、P3までは軟膜に接する細胞が多かったが、P7以降は軟膜との接触が明瞭でない細胞の方が多くなった。このことからP3からP7にかけて軟膜側から深部に向かう細胞移動が示唆される。propidium iodide染色によると、P7やP11でその他の日齢に比べ多くの核分裂像を観察できた。これらの結果から、分布変化と細胞密度の急増はやや時期が異なっており、P7までの細胞密度増加は細胞移動が主たる原因であり、P7からP11までの急激な細胞増加は局所での細胞分裂が主体であることが推測された。

adult, actin, modulator, etc. P0, P3, P11, P28, P60 were identified as normal Wister rat and neonatal microglia. This year, the number of P7 cells increased, and the number of cells increased. The frozen sections of the large forehead were prepared by flow fixation in the solution. Antibodies (anti-rat tβ4 rabbit IgG;1:15000;4℃, 24hr) were detected by immunohistochemistry. Parietal Cortex, Cortical Layer (All), Molecular Layer(M), Outer Cortex(Co), Inner Cortex(Ci), Cell Density, Cell Number Ratio per Site. M part The propidium iodide stain was used to detect mitotic foci and microscopes. The cell density was decreased from P0 to P3, increased from P3 to P11, and increased from P7 to P11. P11 P60 Cell density is low. The ratio of cell number in each part is different from that in each day. The ratio of cell number in each part is different from that in P0, P3, M and Ci. The ratio of cell number in each part is different from that in P7. The ratio of cell number in each part is different from that in P11. The ratio of cell number in each part is different from that in P0, P3, M and Ci. The distribution of P3 and P7 is different. P3, P7, P4, P5, P6, P7, P7, P8, P9, P10, P11, P12, P13, P14, P16, P17, P17, P18, P19, P10, P10, P11, P12, P11, P12, P12, P13, P13, P14, P15, P16, P16, P17, P17, P18, P19, P10, P19, P10, P11, P10, P11, P10 P3, P7, P3, P7, P Propidium iodide staining, P7, P11, and other nuclear fission images The result of this study is that the cell density increases rapidly at different times, and the cell density increases rapidly at different times. The cell movement is mainly caused by the increase in cell density at P7 and P11.