权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

細胞極性決定に関与する膜直下シグナリング複合体の形成機構

决定细胞极性的膜下信号复合物的形成机制

基本信息

批准号：
16048223
负责人：
住本英樹
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Kyushu University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16048223/
关键词：
細胞・組織シグナル伝達脂質蛋白質発生・分化

项目摘要

細胞が正常に機能し調節されるためには、細胞の極性が適切に形成されることが必要である。細胞極性が決定される時には、細胞膜の特定の領域に、極性決定のための蛋白質複合体が形成される。本研究は、哺乳類上皮細胞の極性決定に必要な「aPKC-Par蛋白質複合体(Par6/aPKC/Par3から成る)」が、タイトジャンクション(TJ)形成部位の膜直下に事前に形成されるための分子機構を明らかにすることを目的としている。平成17年度私達は以下のことを見い出した。(1)Par6とaPKCの蛋白質間相互作用は、それぞれのPB1ドメイン(私達が見い出した新規ドメイン)が担うことを私達は明らかにしていたが、本年度は、稲垣教授(北大・院薬)との共同研究によって,Par6-PB1ドメインとaPKC-PB1ドメインの複合体の構造をX線結晶解析により決定した。その情報を基に、哺乳類上皮細胞の細胞極性決定にPar6-aPKC相互作用が必須であることを示し、関与するPar6上およびaPKC上の新規なアミノ酸残基を同定した。(2)Par3に結合する新規な蛋白質を同定する目的で、ヒト胎児脳cDNAライブラリーを用いてPar3をbaitとした酵母two-hybrid法によるスクリーニングを行い、14-3-3蛋白質がPar3α及びPar3β(私達が見い出したPar3の新規ホモログ)に特異的に結合することを見い出した。更に、この結合はリン酸化依存的であること、Par3αのSer-814及びPar3βのSer-764のリン酸化が必須であること等を明らかにした。(3)Par3の哺乳類上皮細胞のTJへの局在には、C末側に存在する数十アミノ酸から成る領域が必要であることを示し、更に、この領域は単独である種の脂質と特異的に結合すること、また、この結合はPar3のTJへの局在に必要であるが十分ではないことを示した。

The normal function of the cell is regulated, and the polarity of the cell is properly formed. When cell polarity is determined, protein complexes are formed in specific areas of cell membrane and polarity is determined. This study aims to clarify the molecular mechanisms underlying the formation of the aPKC-Par protein complex (Par6/aPKC/Par3), which is essential for polarity determination in mammalian epithelial cells. Heisei 17 years private up to the following (1) The protein-protein interaction between Par6 and aPKC was determined by X-ray crystallographic analysis of the structure of the complex of Par6-PB1 and aPKC-PB1 in this year's joint study by Professor Igaki (Peking University Hospital). The information base is required for the determination of cell polarity in mammalian epithelial cells. (2) Par3 protein binding new regulation of protein identity purposes, the use of Par3 bait and yeast two-hybrid method, 14-3-3 protein binding new regulation of Par3 alpha and Par3 beta. In addition, it is necessary to combine Ser-814 and Ser-764 with Par-3α. (3) TJ binding of Par3 in the terminal region of the cell is necessary.