ヒスタミンによる肥満細胞分化制御機構

组胺对肥大细胞分化的调控机制

• 批准号: 13016202
• 负责人: 大津 浩
• 金额: $ 1.47万
• 依托单位: Tohoku University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13016202/
• 关键词: ヒスタミン; 肥満細胞; 分化; ノックアウトマウス; ヒスチジン脱炭酸酵素; 細胞株; 表面抗原; ヘパリン

1)HDCノックアウトマウスの肥満細胞の観察ヒスタミンの合成酵素であるヒスチジン脱炭酸酵素の遺伝子ノックアウトマウスの肥満細胞は,電子顕微鏡で観察すると,顆粒内容物が疎であり,プロテアーゼが減少している事が判明した.その後,ベルベリンという色素で顆粒を染色してみると,染色が弱く,陽性に染色された細胞も少なかった.現在,ヘパリン量の測定を開始しているところである.分化のどの段階で,顆粒に影響を受けたか検討している.2)肥満細胞のFACSによる解析まず,腹腔内の肥満細胞の表面抗体であるFcε受容体と,c-kit受容体を使い分けてみたが,ノックアウトもワイルドタイプも,腹腔細胞の中では,数がすくなくはっきりとした結果が得られなかった.現在,SV40 Large T antigenの遺伝子が入ったノックアウトおよびヘテロ由来の肥満細胞株を樹立できているため,この細胞をマウスの生体内で分化させ,顆粒と表面抗体の変化をみようと考えている.3)HDC遺伝子導入によるレスキュー実験食事中のヒスタミン量を増加させることによって,肥満細胞へのヒスタミンの取り込みが増大することがわかったものの,電顕で見た顆粒像はあまり変化がなかった.HDC遺伝子を再度導入するべく,HDC遺伝子のトランスジェニックマウスとノックアウトマウスとのstrainを合わせるようにバッククロスを行っている.現在6世代まで来ている.また,先ほどの樹立した肥満細胞にHDC遺伝子を再度発現させ,細胞を分化させるとどうなるか検討しているところである.3)野生型マウスからの骨髄移植実験ノックアウトマウスで観察された肥満細胞の表現型が野生型の骨髄をノックアウトマウスに移植することによって,もとの戻るかを確認しようと,骨髄移植実験を行ったが,もとに戻ることは確認できなかった.

1) HDC ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス の against fat cells の 観 examine ヒ ス タ ミ ン の synthetic enzyme で あ る ヒ ス チ ジ ン decarburization acid enzyme の heritage 伝 son ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス は の against fat cells, electronic 顕 micromirror で す was 観 る と, particle contents が 疎 で あ り, プ ロ テ ア ー ゼ が reduce し て い る matter が.at し た. そ の after ベ ル ベ リ ン と い う で pigment particles を dyeing し て み る と, dyeing が weak く, positive に dyeing さ れ た cells less も な か っ た. Now, ヘ パ リ の ン quantity determination を began し て い る と こ ろ で あ る. Differentiation の ど の Duan Jie で, particle に を by け た か beg し 検 て い る. 2) against fat cells の both FACS に よ analytical ま る ず, intra-abdominal の against fat cells の surface antibody で あ る Fc epsilon by body と, c - kit by let body を make い points け て み た が, ノ ッ ク ア ウ ト も ワ イ ル ド タ イ プ も, abdominal cellular の で は, several が す く な く は っ き り と し た results ら が れ な か っ た. Now,SV40 Large T Antigen の posthumous son 伝 が into っ た ノ ッ ク ア ウ ト お よ び ヘ テ ロ origin の against fat cell lines を set で き て い る た め, こ の cells を マ ウ ス の raw で differentiation in vivo さ せ, particle surface antibody の と variations change を み よ う と exam え て い る. 3) traces of HDC 伝 son import に よ る レ ス キ ュ ー be 験 food matter の ヒ ス タ ミ ン in を raised add さ せ る こ と に よ っ て, fat cells against へ の ヒ ス タ ミ ン の take り 込 み が raised large す る こ と が わ か っ た も の の, electric 顕 で see た particles like は あ ま り variations change が な か っ た. Traces of HDC 伝 を son again import す る べ く, traces of HDC 伝 son の ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク マ ウ ス と ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス と の strain を close わ せ る よ う Youdaoplaceholder0 ロスを ロスを lines って る る. Now six generations ま で to て い る. ま た, first ほ ど の set し た against fat cells に HDC heritage 伝 son を 発 again now さ せ, cells を さ せ る と ど う な る か beg し 検 て い る と こ ろ で あ る. 3) wild type マ ウ ス か ら の bone marrow transplant be 験 ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス で 観 examine さ れ た against fat cells の phenotype が wild-type の bone marrow を ノ ッ ク ア ウ ト マ ウ ス に transplantation す る こ と に よ っ て, も と の 戻 る か を confirm し よ う と, bone marrow transplant be 験 を line っ た が, も と に 戻 る こ と は confirm で き な か っ た.

项目成果

Kuramasu, A. et al.: "Identification of novel mast cell genes by serial analysis of gene expression in cord blood-derived mast cells"FEBS Letters. 498. 37-41 (2001)

Kuramasu, A. 等人：“通过对脐带血来源的肥大细胞中的基因表达进行系列分析来鉴定新型肥大细胞基因”FEBS Letters。

Tanaka, S, et al.: "Gastric acid secretion in L-histidine decarboxylase deficient mice"Gastroenterology. 122 (1). 145-155 (2002)

Tanaka, S 等人：“L-组氨酸脱羧酶缺陷小鼠的胃酸分泌”胃肠病学。

Ajoy Kumar Ghosh, et al: "Defective angiogenesis in the inflammation granulation tissue in histidine decarboxylase-deficient mice but not mast cell-deficient mice"J. Exp. Med.. (in press). (2002)

Ajoy Kumar Ghosh 等人：“组氨酸脱羧酶缺陷型小鼠炎症肉芽组织中的血管生成缺陷，但肥大细胞缺陷型小鼠则不然”J.

Ohtsu, H., et al.: "Mice lacking histidine decarboxylase exhibit abnormal mast cells"FEBS Letters. 502. 53-56 (2001)

Ohtsu, H. 等人：“缺乏组氨酸脱羧酶的小鼠表现出异常的肥大细胞”FEBS Letters。