疎水性相互作用を利用した高機能性分子による細胞内分子のリアルタイム機能制御

使用疏水相互作用的高功能分子对细胞内分子进行实时功能控制

• 批准号: 13031013
• 负责人: 菊地 和也
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13031013/
• 关键词: イノシトール3リン酸; レーザー分子不活化; 小分子プローグ; IP_3受容体; Ca^<2+>ストア; Ca^<2+>放出; 組織標本; レーザー照射

MGIP_3のCALI用プローブとしての有効性を検討するために,モルモットの平滑筋組織を用いてCALIを行った.組織標本にMGIP_3を添加しレーザーを照射すると,IP_3によるCa^<2+>放出活性に抑制がみられた.この時、Ca^<2+>ストアへのCa^<2+>取り込み速度やストアからのCa^<2+>漏出速度に変化はみられなかった.一方何も添加しない時,高濃度のIP_3をMGIP_3とに添加した時(競合阻害),CMGやMGIP_3'を添加した時にはレーザー照射による不活性化は起こらなかった.次に,光学系を再構築し,シングルセルレベルでレーザー照射できる系を作製した.この結果,レーザーを照射した細胞内のIP_3受容体のみ不活化することに成功した.以上の実験から,合成小分子プローブ2bを用いたCALIにより,IP_3受容体の機能を特異的に抑制できる事が示された.合成小分子CALIの成功はこれがはじめてであり,生体内分子の機能解明の手段として非常に有用となる事が期待される.

MGIP_3 CALI is used for smooth rib organization. MGIP_3 is added to the tissue and the Ca^+> emission is inhibited. The time, Ca^<2+>, Ca ^<2 +>, Ca ^ When one party adds IP_3, the high concentration of IP_3 and CMG MGIP_3 is added (competition resistance), and when CMG MGIP_3 is added, it is inactivated by irradiation. Second, the optical system is reconstructed, and the system is controlled. As a result, IP_3 receptors in cells were successfully inactivated by irradiation. The above results show that the synthesis of small molecule IP_3 receptor 2b can inhibit the function of IP_3 receptor. The successful synthesis of small molecule CALI is expected to be very useful in understanding the function of molecules in vivo.

项目成果

N.Suzuki, H.Kojima, Y.Urano, K.Kikuchi, Y.Hirata, T.Nagano: "Orthogonality of Calcium Concentration and Ability of 4,5-Diamino fluoresce in (DAF-2) to Detect NO"J. Biol. Chem.. 277. 47-49 (2002)

N.Suzuki、H.Kojima、Y.Urano、K.Kikuchi、Y.Hirata、T.Nagano：“钙浓度的正交性和 (DAF-2) 中 4,5-二氨基荧光检测 NO 的能力”J。

K.Hanaoka, K.Kikuchi, Y.Urano, T.Nagano: "Selective Sensing of Zinc Ion with A Novel Magnetic Resonance Imaging Contrast"J. Chem. Soc. Perkin. Trans. 2. 1840-1843 (2001)

K.Hanaoka、K.Kikuchi、Y.Urano、T.Nagano：“利用新型磁共振成像对比度选择性传感锌离子”J。

H.Kojima, M.Hirotani, Y.Hirata, T.Nagano: "Bioimaging of Nitric Oxide with Fluorescent Indicators Based on Rhodamine Chromophore"Anal.Chem.. 73. 939-942 (2001)

H.Kojima、M.Hirotani、Y.Hirata、T.Nagano：“基于罗丹明发色团的荧光指示剂对一氧化氮进行生物成像”Anal.Chem.. 73. 939-942 (2001)

T.Inoue, K.Kikuchi, K.Hirose, M.Iino, T.Nagano: "Small Molecule-based Laser Inactivation of Inositol 1,4,5-Trisphosphate Receptor"Chem. Biol.. 8. 9-15 (2001)

T.Inoue、K.Kikuchi、K.Hirose、M.Iino、T.Nagano：“基于小分子的激光灭活肌醇 1,4,5-三磷酸受体”Chem。

H.Takakusa, K.Kikuchi, Y.Urano, T.Higuchi, T.Nagano: "Intramolecular Fluorescence Resonance Energy Transfer System with Coumarin Donor Included in beta-Cyclodextrin"Anal. Chem.. 73. 1967-1973 (2001)

H.Takakusa、K.Kikuchi、Y.Urano、T.Higuchi、T.Nagano：“β-环糊精中包含香豆素供体的分子内荧光共振能量转移系统”分析。