课题基金 / 基金详情

自動点滅する蛋白質ラベル化プローブ：１分子及び超解像顕微鏡応用

自動点滅する蛋白質ラベル化プローブ：１分子及び超解像顕微鏡応用
自动闪烁蛋白质标记探针：单分子和超分辨率显微镜应用
批准号：
16F16331
负责人：
菊地 和也
金额：
$1.47万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2016
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2016-11-07 至 2019-03-31
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16F16331/
关键词：
超解像イメージング化学プローブ蛋白質ラベル化光スイッチングPYPタグ蛍光制御

项目摘要

项目成果

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蛋白質の局在、動態の可視化は蛋白質の機能を解明するだけでなく、その生理機能に関わる疾患の治療法や薬剤の開発に貢献できる重要な技術である。特に近年、超解像イメージングが開発されたことで蛋白質局在が光の回折限界を下回る分解能で明らかにできるようになった。しかしながら、現状の超解像イメージング法では時間分解能や色素の光退色、生細胞への応用に課題が残っている。加えて、超解像イメージングに適した蛍光色素を目的の蛋白質に標識する手法も重要である。本研究では光照射により蛍光制御能を変化させる分子の開発と蛋白質ラベル化プローブの開発を実施した。PALM/STORM法やRESOLFT法を利用した超解像イメージングでは光スイッチング可能な蛍光制御分子が求められる。そこで、光照射により蛍光を制御できる分子の探索の結果、アリルアゾピラゾール（AAP）を消光剤として利用することに着目した。AAPはcis体、trans体を取りうるため、各異性体の蛍光色素に対する消光能を評価した。高コントラストな蛍光画像を得る上で、洗浄操作なしで迅速かつ低濃度で蛋白質を標識することのできる蛍光プローブの開発が重要である。このようなプローブに要求される条件は、遊離状態では非蛍光性で、標識されると蛍光強度が上昇するとともに、その標識速度が速い必要がある。これまでにPYP（Photoactive yellow protein）とよばれる小さな蛋白質をタグとしたラベル化技術を開発してきた知見を基に、PYPタグのリガンドとなる分子設計の拡張のため、PYPタグを介したラベル化の反応点となるCys69のチオール基と反応する新たな官能基を探索した。
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会议论文
Perfluorocarbon-Based (19) F MRI Nanoprobes for In Vivo Multicolor Imaging.
DOI： 10.1002/anie.201810363
发表时间： 2018-12-17
期刊： Angewandte Chemie (International ed. in English)
影响因子： --
作者： [Akazawa K, Sugihara F, Nakamura T, Matsushita H, Mukai H, Akimoto R, Minoshima M, Mizukami S, Kikuchi K]
通讯作者： Kikuchi K
New Biological Findings Which Were Clarified by Designed Chemical Probes
通过设计的化学探针阐明了新的生物学发现
DOI： --
发表时间： 2018
期刊：
影响因子： --
作者： [耒代誠仁, 高田祐一, 井上幸, 方国花, 馬場基, 渡辺晃宏, 井上聡, Kikuchi Kazuya]
通讯作者： Kikuchi Kazuya
In vivo Chemical Probes for MRI and Fluorescence Imaging
用于 MRI 和荧光成像的体内化学探针
DOI： --
发表时间： 2019
期刊：
影响因子： --
作者： [小阪 高広, 山口 哲志, 泉田 森, 岡本 晃充, Kikuchi Kazuya]
通讯作者： Kikuchi Kazuya
Design and Development of PYP-tag Coumarin Ligands with Halomethyl Ketone Moieties for Fluorogenic Protein Labeling
用于荧光蛋白标记的具有卤甲基酮部分的 PYP 标签香豆素配体的设计和开发
DOI： --
发表时间： 2018
期刊：
影响因子： --
作者： [Kumar Naresh, Hori Yuichiro, Kikuchi Kazuya]
通讯作者： Kikuchi Kazuya
共 7 条
    化学プローブのデザイン・合成が拓くin vivoイメージング
    • 批准号：
      24H00494
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $31.62万
    • 财政年份：
      2024
    • 负责人：
      菊地 和也
    • 依托单位：
      Osaka University
    Super-resolution imaging probe using novel chemical switch
    • 批准号：
      23KK0106
    • 项目类别：
      Fund for the Promotion of Joint International Research (International Collaborative Research)
    • 资助金额：
      $13.48万
    • 财政年份：
      2023
    • 负责人：
      菊地 和也
    • 依托单位：
      Osaka University
    Development of functional fluorescent probe for imaging osteocyte function and 4D nucleomics
    • 批准号：
      21H04706
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research (A)
    • 资助金额：
      $26.96万
    • 财政年份：
      2021
    • 负责人：
      菊地 和也
    • 依托单位：
      Osaka University
    がん細胞転移を可視化するシステインプロテアーゼ蛍光プローブ
    • 批准号：
      18F18116
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for JSPS Fellows
    • 资助金额：
      $1.47万
    • 财政年份：
      2018
    • 负责人：
      菊地 和也
    • 依托单位：
      Osaka University
    海外基金