モデルマウスを用いた聴覚障害原因遺伝子のポジショナルクローニング

使用小鼠模型定位克隆导致听力障碍的基因

• 批准号: 13204028
• 负责人: 木南 凌
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13204028/
• 关键词: モデルマウス; 聴覚・平衡感覚障害; ポジショナルクローニング; カドヘリン; フレームシフト変異

研究の目的。モデルマウスを利用し聴覚障害原因遺伝子を単離する。続いて、ヒト相同遺伝子を単離し、早期遺伝子診断法を開発する。vn(niigata waltzer)マウスはICRマウスから突然変異により誕生した聴覚・平衡感覚障害を示す新しい変異マウスである。この変異を担う原因遺伝子をポジショナルクローニングする。研究成果。ホモのMSMマウスをvnマウスに戻し交配し、1700個体を得た。マウス全染色体上のマーカーを用い、これらの戻し交配個体について連鎖解析を行った。その結果、vn遣伝子座はD10Mit59からD10Mit258までの2.67cMの範囲に存在することが明らかとなった。この領域の二つのBACクローンについてランダム塩基配列決定を行い、遺伝子・エクソンを検索した結果、一つの候補としてカドヘリン様遺伝子がみつかった。vnマウスcDNAの塩基配列決定を行うと、Cdh23遺伝子にフレームシフト変異を検出した。それは146番目のGがvnマウスでは欠失することによる。さらにゲノムDNAを調べたところ、この一塩基の欠失はイントロン2の3'側のAG部位のGがAに置換することにより生ずることがわかった(その結果、AAGとなる)。これによりカドヘリン23遺伝子がvnマウスの変異の原因遺伝子であることが判明した。なお、Waltzer(V)変異はvn変異とallelicであるが、この変異マウスの解析がドイツのグループによって行われ、その原因遺伝子は新しいタイプのカドヘリン・Cdb23であった。ヒト相同遺伝子の変異はUscher syndrome type1D症候群を示すことが同時に報告された(独、米の2研究室から)。

Purpose of the study. The reason for the damage is that Early detection of the same gene was developed. vn(niigata waltzer) The reason for this difference is that the number of cases is not equal to the number of cases. Research results. MSM is the first to receive a female. The genetic linkage of the whole chromosome is carried out. As a result, Vn is located at D10Mit59 and D10Mit258, and there is a range of 2.67cM. This domain has two sets of BAC parameters, one set of BAC parameters, and one set of BAC parameters. Vn cDNA sequence determination, Cdh23 cDNA sequence determination However, the 146-channel G/vn switch is not available. The DNA sequence is modified by A sequence of G and A substitutions on the 3'side of the DNA sequence. The reason for the difference between the two groups is that the two groups are different. Waltzer(V) is different from Vn is different from allelic is different from Vn is different from allelic is different from Vn is different from allelic is different from Vn is different from allelic is different from Vn is different from Vn is different from allelic is different from Vn is different from Vn is different from V The same genetic variation was observed in Uscher syndrome type1D syndrome, which was reported simultaneously (in two laboratories).

项目成果

Kazunori Shiraishi: "Persistent induction of somatic reversions of the pick-eyed unstable mutation in F1 mice born to fathers irradiated at the spermatozoa stage"Radiation Research. (in prss). (2002)

Kazunori Shiraishi：“在精子阶段受到辐射的父亲所生的 F1 小鼠中持续诱导挑眼不稳定突变的体细胞逆转”辐射研究。

Akira Yoshimura: "Mononucleosomes Assembled on a DNA Fragment Containing (GGA/TCC)(n) Repeats Can Form a DNA-DNA Complex"Biochemical Biophysical Research Communications. 290. 16-22 (2002)

Akira Yoshimura：“在含有 (GGA/TCC)(n) 重复的 DNA 片段上组装的单核小体可以形成 DNA-DNA 复合物”生物化学生物物理研究通讯。

Ryo Kominami: "Genetic analysis of radiation -induced thymic lymphoma"International Congress Series. 715. 224-231 (2001)

Ryo Kominami：“辐射诱发胸腺淋巴瘤的基因分析”国际大会系列。

Yuko Saito: "Genetic loci controlling susceptibility to γ-ray-induced thymic lymphoma"Oncogene. 20. 5243-5247 (2001)

Yuko Saito：“控制 γ 射线诱导胸腺淋巴瘤易感性的基因座”Oncogene。20. 5243-5247 (2001)

Tadashi Wada: "A Point Mutation in a Cadherin Gene, Cdh23, Causes Deafness in a Novel Mutant, Waltzer Mouse Niigata"Biochem. and Biophy. Res. Comm.. 283. 113-117 (2001)

Tadashi Wada：“钙粘蛋白基因 Cdh23 中的点突变导致新型突变体新泻华尔兹小鼠耳聋”Biochem。