癌細胞にみられる染色体異常へのテロメアの関与

端粒参与癌细胞中发现的染色体异常

• 批准号: 05152049
• 负责人: 木南 凌
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Cancer Research
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05152049/
• 关键词: 染色体異常; テロメア; X染色体

染色体異常の見られる癌は予後が悪く、悪性度が高い傾向にあることから、この染色体変異は癌化・癌の悪性化の一因を成すものと考えられる。本研究は癌細胞の進展・悪性化の過程での染色体変異とテロメア変異との関連性を、一つの染色体に注目して追求した。C6細胞株にPhIP(10μM)を投与すると、高頻度にX染色体の構成比の異常を起こすことが明らかとなった。PhIP投与後、2日目に再び細胞をクローン化し、細胞が10^6まで増殖した後、そこからDNAを抽出した。X染色体の5か所のマイクロサテライトをプローブとしPCR反応を行い、PCR産物の示す多型バンドの濃度変化をゲル電気泳動で調べた。X染色体マーカー(DXMit5)のB6特異的バンドがMSMバンドに比べ著しく薄くなっていたことが分かった。この結果はB6由来の不活化したX染色体が脱落し易いことを示している。さて、この脱落の機構として、X染色体のテロメアからmo-2領域にかけての反復配列に組換え変異が起こり、テロメア機能が損傷されたのが1つの原因であると仮定し、この作業仮説が正しいかどうかを知るためにテロメアの長さを測定した。B6由来のX染色体の組成が低くなったクローンを17株単離し、この細胞小塊を、アガロース・ブロックに埋め込んだ。そのゲル中でDNAを精製し、制限酵素・EcoRI、BstEII、HaeIII、およびAluIで切断した。DNA断片を長さによりPFGE電気泳動法で分画し、そのゲルを乾燥させたものに対し、合成したmo-2プローブおよびTTAGGG配列からなるテロメアプローブをハイブリダイズさせた。テロメアのサイズの変化は検出されるバンドの変化として検出される。現在、実験が終了していない段階だが、テロメアの変異は検出されるが、X染色体のテロメアが特異的に変異を起こすという結論は得られていない。

Chromosome abnormalities are found in cancer, and there is a tendency for high sex. This study focuses on the development and differentiation of cancer cells, and on the relationship between chromosome differentiation and differentiation C6 cell line PhIP(10μM) was found to have high frequency of X chromosome structural abnormalities. After PhIP injection, 2 days later, the cells were transformed, 10^6 cells were propagated, and DNA was extracted. The expression of DNA in the 5-site DNA sequence of the X chromosome is regulated by DNA sequencing. X-chromosome (DXMit5) and B6-specific genes were identified in the study. As a result, B6 was inactivated and X chromosome was shed. In addition, the mechanism of this shedding is determined by the determination of the length of the X chromosome's repeated alignment in the Mo-2 domain, and the causes of the damage are determined by the determination of the length of the X chromosome's repeated alignment. B6 is derived from the X chromosome composition of 17 strains isolated, small cell blocks, small cells, small cells and small cells. DNA purification, restriction enzymes EcoRI, BstEII, HaeIII, and AluI cleavage DNA fragment length: PFGE Electrophoresis: DNA fragment length: PFGE electrophoresis: The change of the color of the film is not only the color of the film, but also the color of the film. Now, we can conclude that there is no difference between the two stages of chromosome development and X chromosome development.

项目成果

Hayashi,T.et al.: "Telomere change and loss of heterozygosity of mouse primary tumors and cell lines." Jpn.J.Cancer Res.84. 1292-1299 (1993)

Hayashi,T.et al.：“小鼠原发性肿瘤和细胞系的端粒变化和杂合性丧失。”