組換えを起こしやすい反復配列に結合するタンパクの分離

分离与易于重组的重复序列结合的蛋白质

• 批准号: 05255201
• 负责人: 木南 凌
• 金额: $ 1.6万
• 依托单位: Niigata University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1993
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1993 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-05255201/
• 关键词: 組換え; 反復配列

真核生物のゲノム中には多くの種類の縦列型反復配列が存在する。それらは染色体のセントロメア領域やテロメア領域に大量に存在するが、染色体に散在している反復配列もある。ミニサテライトやマイクロサテライト等がそのよく知られた例である。縦列型反復配列は相同な配列が隣接しているわけだから、組換え反応を起こし易いという特色を持つ。反復配列に見られる組換え反応の生物学的意義や分子機構を知るために、我々はGGAという3塩基が繰り返す反復配列を研究対象としてきた。それは2本の2重鎖DNA鎖がグアニン:グアニン結合し、複合体形成をとり易いという特色がある。(CCT/GGA)nのようにHomopurine:homopyrimidine鎖が繰り返す配列は、triplex構造やcruciform構造などの特異な構造をとることが報告されている。これらの構造は、組換え反応の中間体の一つと考えられるので、その構造特性を検討した。(GGA/TCC)n 配列は、環状および線状DNAでS1ヌクレアーゼに感受性をもつ。(GGA/TCC)n配列を含むプラスミドDNAを合成ヌクレオチド(GGA)11と、インキュベーションすると、電気泳動で遅れる見かけ上3本鎖の会合分子ができあがる。その構造を、DMS(ジメチル硫酸)処理、DEPC修飾(一本鎖プリン塩基を特異的に修飾)、オスミウム酸修飾(一本鎖ピリミヂン塩基を特異的に修飾)、DNase I消化を用い、検討した。3薬物処理では、CCT鎖が顕著に修飾された。これはG:Gペアリングにより2本のGGA鎖が結合し、CCT鎖が一本鎖構造をとることを示唆している。また、この複合体はtriple strandに見られるDNase I抵抗性を示さなかった。従って、(GGA/TCC)n反復配列はtriplex構造とは異なった構造をとると考えられる。一方、Guanine-richなGGA鎖はテロメアと類似構造を持つので、テロメアに見られる逆平行のG:G pairingを示すかどうかを検討した。その結果、テロメアとは異なる平行の結合をすることが分かった。この特異な構造体の意義については今後の課題として残っている。

In eukaryotic organisms, there are many kinds of repetitive alignment. A large number of chromosomes exist in different regions, and the chromosomes are scattered in different regions.ミニサテライトやマイクロサテライト等がそのよく知られた例である。The arrangement type is repeated, the arrangement is the same, the arrangement is adjacent, the arrangement is reversed, the characteristics are maintained The biological significance of the repeated alignment is discussed in detail below. 2-fold DNA lock: 2-fold DNA lock: 2-fold DNA (CCT Homopurine:homopyrimidine locks are arranged in rows and triplexes, cruciform structures are arranged in columns and triplexes, and special structures are arranged in columns and triplexes. The structural characteristics of these intermediates are discussed. (GGA/TCC)n alignment, circular linear DNA S1 (GGA/TCC)n sequence contains the sequence of DNA synthesis, DNA synthesis, and electrophoresis. Structure, DMS treatment, DEPC modification (a specific modification of the amino acid group), DNA modification (a specific modification of the amino acid group), DNase I digestion, and investigation. 3. Chemical treatment, CCT lock and modification. G:G: The complex has a triple strand and is resistant to DNase I. (GGA/TCC)n repeated arrangement triplex structure A square, Guanine-rich GGA lock is similar to the structure of the G:G pairing. The result is that there is no difference between the two. The significance of this unique structure is the subject of future research.

项目成果

Hayashi,T.et al.: "Telomere change and loss of heterozygosity of mouse primary tumors and cell lines." Jpn.J.Cancer Res.84. 1292-1299 (1993)

Hayashi,T.et al.：“小鼠原发性肿瘤和细胞系的端粒变化和杂合性丧失。”

Suzuki,S.,et al.,: "Two mouse hypervariable minisatellites:chromosomal location and simultaneous mutation." J.Biochem.114. 292-296 (1993)

Suzuki,S.,et al.，“两个小鼠高变小卫星：染色体定位和同时突变。”

Kitazawa,T.,et al.: "2-Hydroxyamino-1-methyl-6-phenylimidazo[4〓5-b]pyridine(N-OH-PphIp)induces recombi national mutations in mammalian cell lines as detected by DNA fingerprinting." Mol.Carcinogenesis. 9. 67-70 (1994)

Kitazawa, T. 等人：“通过 DNA 指纹识别检测，2-羟基氨基-1-甲基-6-苯基咪唑[4〓5-b]吡啶 (N-OH-PphIp) 会诱导哺乳动物细胞系中的重组国家突变。 “分子致癌作用。9. 67-70 (1994)

Naito,E.et al.,: "Sex determination using the hypomethylation of a human macro-satellite DXZ4 in female cells." Nucl.Acids Res.21. 2533-2534 (1993)

Naito,E.等人：“利用女性细胞中人类大卫星 DXZ4 的低甲基化来确定性别。”

Hayashi,T.et al.,: "A variant family of mouse minor satellite located on the centromeric region of chromo some2." Genomics.17. 490-492 (1993)

Hayashi,T.et al.：“位于染色体 some2 着丝粒区域的小鼠小卫星变体家族。”