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バクテリア多様なparAB分配遺伝子の基本分子機構の研究

parAB分布基因在多种细菌中的基本分子机制研究

基本信息

批准号：
13206076
负责人：
仁木宏典
金额：
$ 4.16万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13206076/
关键词：
分配大腸菌プラスミド染色体外因子染色体ゲノムバクテリア

项目摘要

バクテリアのプラスミドDNAは独自の分配機構により娘細胞へと正確に分配されている。これにはParA、ParBとよばれるDNA結合性タンパクとプラスミド分配においセントロメアとして機能する。この分配過程において、細胞中央部に局在していたプラスミドDNAが複製後、細胞長の1/4と3/4に移動し、細胞が分裂するまでこの位置に局在することが知られている。本研究課題ではParABタンパクの分配におけるこの局在と移動の機構、さらにその局在に関する宿主因子の解析を目的とした。parAとparB遺伝子どちらか一方でも欠損した場合、どちらも、分配機構を全く持たないプラスミドと同等の宿主細胞保持率に低下する。しかしながら、プラスミドDNAの細胞内局在性は両者で全く異なっていた。parA欠損プラスミドでは細胞端の細胞質部分に位置する傾向にあった。これは、分配遺伝子を全くもたない場合の細胞内分布と同じであった。一方、parB欠損プラスミドは正常な分配遺伝子をもつプラスミドと同様に細胞中央部に局在するが、細胞中央部から1/4,3/4部位への移動が阻害され正常な分配ができなくなっていた。このことからは、ParBタンパク質が細胞中央部の細胞内の特定の位置にparC領域を介してプラスミドDNAを局在させていることが示唆された。このような現象はFプラスミド、P1ファージのどちらの分配機構でも観察されParBの共通した役割と考えられる。Vibrio cholerae、Deiococus radiodurans染色体ではそれぞれ2組と4組のparAB遺伝子がゲノム解析から見出されている。これら計6組のparAB遺伝子をPCRクローニングして、プラスミドでの分配活性を大腸菌で調べた。こららのparAB遺伝子を持つプラスミドはいずれも容易に宿主細胞から脱落しプラスミドの分配機能は見出されなかった。

バクテリアのプラスミドDNAは a separate distribution mechanism により婊婷婷へとcorrect distribution されている. ParA and ParB DNA-binding properties and functional properties Distribution process, the central part of the cell, the central part of the cell, the DNA, the length of the cell, and the replication of the DNA. 1/4と3/4にmoveし、cell divisionするまでこのpositionにbureau inすることが知られている. The subject of this research is the allocation of the par AB におけるこの bureau in と mobile の institution, さらにその bureau in に switch する host factor の analysis を purpose とした. parAとparB弝子どちらかOne side is missing, the distribution mechanism is full, the distribution mechanism is full, the host cell retention rate is low, and the host cell retention rate is low.しかしながら、プラスミドDNAのcell localizationは両人で全くdifferentなっていた. parA is defective in the location of the cytoplasmic part of the cell end and the tendency of the damage.これは、Distribution of the remaining 伝子を全くもたない cases of intracellular distribution と同じであった. On the one hand, parB is damaged by the normal distribution of the remaining parts of the central part of the cell. The central part of the cell moves 1/4 and 3/4 and blocks the normal distribution of the cells.このことからは、ParBタンパク性がA specific location within the cell in the central part of the cell The parC field is a DNA bureau in the field of parC.このようなphenomenonはFプラスミド、P1ファージのどちらのdistribution agency でも観看されParBの公通した丨开えられる. Vibrio cholerae, Deiococus radiodurans chromosomes ではそれぞれ 2 groups と 4 groups のparAB legacy 伝子がゲノムANALYSIS から见出されている.これらA total of 6 groups of のparAB 缝子をPCRクローニングして, プラスミドでのdistribution activity of coliform bacteria and でべた.こららのparAB remains 伝子をhold つプラスミドはいずれもIt is easy to にThe host cell から comes off and the distribution function は见出されなかった.