神経変性疾患における異常リン酸化タウの蓄積機構の解明

阐明神经退行性疾病中异常磷酸化 tau 的积累机制

• 批准号: 13210032
• 负责人: 長谷川 成人
• 金额: $ 4.93万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13210032/
• 关键词: 脳神経疾患; 痴呆; 老化; プロテオーム; 蛋白質

(1)試験管内モデルFTDP-17のミスセンス変異(P301L、V337M、K257T、G389R)を導入したリコンビナントタウを大腸菌に発現、精製し、ヘパリン存在化でタウの線維形成を電子顕微鏡で観察したところ、変異を有するタウは野生型タウ(WT)よりも多くの線維形成がみられ、変異の線維形成促進効果が観察された。その効果はP301Lが最も大きかった。またタウをラット脳粗抽出液でリン酸化して線維化したところ、タウの線維形成の促進が観察された。ヘパリンを添加しない系においても線維形成までは時間がかかったが、同様の結果が得られた。線維化したタウを遠心後、上清と沈澱に分けて、線維化タウを定量したが、電子顕微鏡による観察とほぼ一致した結果が得られた。今回の実験から、タウの変異が線維化を促進することが確認されたと共に、リン酸化がタウの線維化を促進すること、リン酸化と変異の効果が相加的に働くことが試験管内のタウの線維化実験においてはじめて観察された。(2)動物モデル野生型ヒトタウ、及びFTDP-17のP301L、P301S変異を導入したタウを過剰発現するトランスジェニックショウジョウバエを作製し、それぞれのタウがハエの脳内で発現していることを免疫組織染色で確認した。(3)Lewy小体に蓄積するα-synucleinのリン酸化の同定。Lewy小体型痴呆患者脳に蓄積しているα-synucleinを精製し、アミノ酸配列解析、質量分析を行ったところ、蓄積しているα-synucleinの129番目のセリンが高度にリン酸化されていることを発見した。リン酸化ペプチドを合成し特異的抗体を調製して免疫化学的解析をしたところ、正常では5%程度しかリン酸化されていないのに対し、蓄積しているものは90%以上リン酸化されていることを見出した。

(1) the microphones (P301L, V337M, K257T, G389R) are imported into the pipeline. The detection of bacteria, the detection of fine bacteria, the formation of microphones, the detection of bacteria, the formation of microphones, and the formation of microphones. The formation and promotion of the situation has led to a lot of observation. The P301L is the most expensive. The crude extract was used to acidify the crude extract, to improve the quality of the crude extract, and to promote the formation of the crude extract. When you add a message to your account, you will have a problem with each other, and the result of the same test will be correct. After the maintenance of the information system, the separation of the supernatant, the quantitative analysis of the analysis, and the results of the consistent results obtained by the computer micro-computer. This time, we are going to make sure that we are in common, that we are going to make sure that we are in common, that we are going to make sure that we are in common, that we are going to make sure that we are in common, that we are going to make sure that we are going to make a difference, and that we are going to be able to make sure that we are going to be able to make sure that we are going to have an impact on each other. (2) the animals were infected with FTDP-17, P301L and P301S, and the immune tissue staining was confirmed by immunostaining. (3) the storage of Lewy corpuscles is identical with that of α-synuclein acidification. Patients with Lewy small dementia were treated with high level of acidification, such as alpha-synuclein sperm, acid arrangement, quantitative analysis, alpha-synuclein and histopathology. Immunochemical analysis of antibodies specific to the synthesis of specific antibodies, normal, 5%, normal, acidified, stored, acidified, stored, acidified, acidified, acidified,

项目成果

Hayashi S, Toyoshima Y, Hasegawa M, et al.: "Late-onset frontotemporal dementia with a novel exon 1 (Arg5His) tau gene mutation."Ann Neurol. (in press).

Hayashi S、Toyoshima Y、Hasekawa M 等人：“具有新型外显子 1 (Arg5His) tau 基因突变的迟发性额颞叶痴呆。”Ann Neurol。

Mori H, Motoi Y, Kobayashi T, Hasegawa M, et al: "Tau accumulation in a patient with pallidonigroluysian atrophy"Neurosci Lett. 309. 89-92 (2001)

Mori H、Motoi Y、Kobayashi T、Hasekawa M 等人：“苍白球卢伊萎缩患者中的 Tau 积累”Neurosci Lett。

Hasegawa M, Fujiwara H, Domae N, et al.: "α-synuclein is phosphorylated in synucleinopathy lesions"Nature Cell Biology. 4. 160-164 (2002)

Hasekawa M、Fujiwara H、Domae N 等人：“α-突触核蛋白在突触核蛋白病病变中被磷酸化”《自然细胞生物学》4. 160-164 (2002)。

Kuzuhara S, Kokubo Y, Sasaki R, Narita Y, Yabana T, Hasegawa M et al.: "Familial amyotrophic lateral sclerosis and parkinsonism-dementia complex of the Kii Peninsula of Japan : clinical and neuropathological study and tau analysis"Ann Neurol. 49. 501-11 (

Kuzuhara S、Kokubo Y、Sasaki R、Narita Y、Yabana T、Hasekawa M 等人：“日本纪伊半岛的家族性肌萎缩侧索硬化症和帕金森痴呆症复合体：临床和神经病理学研究以及 tau 分析”Ann Neurol。

Miyamoto K, Kowalska A, Hasegawa M et al: "Familial frontotemporal dementia and parkinsonism with a novel mutation at an intron 10+11-splice site in the tau gene"Ann Neurol. 50. 117-20 (2001)

Miyamoto K、Kowalska A、Hasekawa M 等人：“家族性额颞叶痴呆和帕金森病，tau 基因内含子 10 11 剪接位点出现新突变”Ann Neurol。