タウ、aシヌクレインを介した神経変性の解明と治療に関する研究

tau 和 a-synuclein 介导的神经变性的阐明和治疗研究

• 批准号: 17025052
• 负责人: 長谷川 成人
• 金额: $ 3.71万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Organization for Medical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17025052/
• 关键词: タウ; 線維形成; 封入体; ユビキチン; FTDP-17; 微小管; ピック病; 進行性核上性麻痺

1.患者脳に蓄積するタウ、αシヌクレインのプロテアーゼ耐性領域の解析と凝集機構の解明アルツハイマー病(AD)、ピック病(PiD)、皮質基底核変性症(CBD)、進行性核上性麻痺(PSP)、FTDP-17患者剖検脳から線維化したタウを含むSarkosyl不溶性画分を高濃度のトリプシンで処理し、電気泳動しPVDF膜に転写後、プロテアーゼに耐性を示すフラグメントをCBB染色、及び各種部位に対するリン酸化依存性、非依存性タウ抗体を用いて免疫化学的解析を行った。その結果、AD、PiD、CBD、PSP、FTDP-17でそれぞれ異なるバンドパターンが検出された。また抗体を用いた解析からいずれも微小管結合部位を含む領域からなることが示された。同じ4リピートタウが蓄積するCBDとPSPにおいてもプロテアーゼに耐性バンドのパターンは異なっていた。2.タウ、αシヌクレインの凝集阻害剤の検索とその阻害機構の解明抗Aβ、抗プリオン凝集阻害作用などが報告されている低分子化合物などをふくむ79化合物について、タウ、αシヌクレイン、及びAβの線維化抑制効果の検討を行った。大腸菌で発現したタウ、αシヌクレインを高度に精製し、化合物と共に37度で3〜5日程度インキュベートした後、線維化したものを定量して阻害活性を調べた。凝集タンパクの検出は電子顕微鏡による観察、チオフラビンSの蛍光強度測定、及びサルコシル不溶性蛋白質の検出の3つの方法で行った。その結果、いくつかの種類の化合物にタウ、αシヌクレイン、Aβの線維化阻害する強い効果が観察された。阻害されたものの可溶性画分にはSDS安定なオリゴマーの形成が共通にみられ、阻害化合物がオリゴマーに働いて安定化する機序が示唆された。また阻害剤存在下で形成されたシヌクレインのオリゴマーに細胞毒性は観察されなかった。

1. Analysis of the accumulation of sarkosyl-containing insoluble proteins in the resistant domain of patients, resolution of aggregation mechanisms in AD, PiD, CBD, PSP, FTDP-17, electrophoresis and PVDF membrane after writing, The expression of CBB and the expression of CD4 + CD Results, AD, PiD, CBD, PSP, FTDP-17 are available for inspection. Also, the antibody was used to analyze and display the microtubule binding site in the field. The same applies to CBD and PSP. 2. Study on the inhibition mechanism of aggregation inhibitors and inhibitors of α-and α-amyloids and the inhibition effect of Aβ-and α-amyloids on the aggregation inhibition of α-amyloids and α-amyloids. Coliform bacteria are found in highly refined, highly purified, and chemically modified compounds at 37 ° C for 3 to 5 days. The three methods for detection of aggregation and detection of insoluble proteins by electron microscopy, determination of fluorescence intensity, and detection of insoluble proteins were developed. The results showed that the strong effects of various kinds of compounds, such as α, β, αThe mechanism for the formation of soluble compounds in SDS and the mechanism for the formation of soluble compounds in SDS are described. In the presence of a toxic agent, the formation of a cytotoxic agent

项目成果

Biochemistry and molecular biology of tauopathies

• DOI: 10.1111/j.1440-1789.2006.00666.x
• 发表时间: 2006-10-01
• 期刊: NEUROPATHOLOGY
• 影响因子: 2.3
• 作者: Hasegawa, Masato

Small Molecule Inhibitors of alpha-Synuclein Filament Assembly.

α-突触核蛋白丝组装的小分子抑制剂。

• 发表时间: 2006
• 期刊: Biochemistry (in press)
• 作者: Masuda;M.;Suzuki;N.;Goedert;M.;Hasegawa;M.
• 通讯作者: M.

Cysteine misincorporation in bacterially expressed human alpha-synuclein.

• 发表时间: 2006
• 期刊: FEBS letters
• 影响因子: 3.5
• 作者: Masami Masuda;N. Dohmae;T. Nonaka;Takayuki Oikawa;S. Hisanaga;M. Goedert;M. Hasegawa

Unique tauopathy in Fukuyama-type congenital muscular dystrophy

• DOI: 10.1097/01.jnen.0000190069.10633.c2
• 发表时间: 2005-12-01
• 期刊: JOURNAL OF NEUROPATHOLOGY AND EXPERIMENTAL NEUROLOGY
• 影响因子: 3.2
• 作者: Saito, Y;Motoyoshi, Y;Murayama, S
• 通讯作者: Murayama, S

Tau-positive fine granules in the cerebral white matter : a novel finding exclusive to parkinsonism-dementia complex of Guam among the tauopathies

大脑白质中的tau蛋白阳性细颗粒：关岛tau蛋白病中帕金森病-痴呆症所特有的新发现

• 发表时间: 2005
• 期刊: J.Neuropathol.Exp.Neurol 64
• 作者: Yamazaki;M.;Hasegawa;M.;Mori;O.;et al.
• 通讯作者: et al.