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HIV外皮蛋白断片gp41-C34を基にした人工設計型細胞融合阻害剤の創製研究

基于HIV外壳蛋白片段gp41-C34人工设计细胞融合抑制剂的研究

基本信息

批准号：
13226055
负责人：
玉村啓和
金额：
--
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

HIVの外被蛋白質gp41には膜融合成立に必須な2ヶ所のα-helix部位を含む。すなわち、gp41の細胞外ドメイン中、そのN端側(N-region)およびC端側(C-region)に存在する2つの領域である。膜融合時には、N-regionはtriple helixを形成し、引き続きC-regionがhelixを形成してN-regionのtriple helixを取り囲み、アンチパラレルな6-helical bundle構造が形成され、その結果、ウイルス側と標的細胞側の膜が近付き、膜融合が成立するものと推定されている。従って、この6-helical bundle構造形成阻害剤創製のため、我々は、C-regionの34残基のペプチド(C34)を基盤とし、C34ペプチドの臨床応用を妨げていると考えられる難溶性を克服し、かつその抗HIV活性を向上させたペプチド(Soluble C34;SC34)のde novoデザイン、合成を行った。C34は、N-region由来のN36ペプチドと相互作用し、前述の6-helical bundle構造を取ることがX線結晶解析より明らかにされている。そこで、C34とN36の相互作用様式を参考に以下のコンセプトによるSC34のデザインを行った。(1)C34のN36との相互作用部位は既存の配列とする。(2)6-helical bundle構造の外側に位置する溶媒接触領域(b, f, c, g位)には側鎖間salt bridge形成によるα-helicity及び水溶性の向上を目的に、i-i+4位にGlu及びLys置換を導入する。以上のコンセプトに基づき合成したSC34は、C34に較べ大幅な水溶性の向上が見られ、さらにその抗HIV活性を測定したところ現在phaseIII臨床試験中であるC-peptideの1つT-20の約10倍、C34とほぼ同等の活性を示すことが明かとなった(IC_<50>=1.0nM)。また、SC34は、T-20耐性HIV株にも有効であった。これらの結果より、我々のデザインコンセプトは、HIV-cell fusion inhibitorの開発に有用なものであると判断した。

The fusion of the outer protein gp41 membrane of HIV must contain the α-helix site of the protein 2. In the extracellular domain of gp41, there is a domain of domain in N-terminal (N-region) and C-terminal (C-region). When the membrane is fused, the N-region triple helix is formed, the helix is induced, the N-region is generated, the triple helix is generated, the 6-helical bundle is generated, the results are obtained, the cell membrane is closed, and the membrane is fused to establish a presumptive response. Anti-HIV, 6-helical bundle, anti-HIV activity, anti-HIV activity, Soluble C34, Soluble C34, c34, c34, c34, The origin of C34 and N-region is the interaction of N36 and the aforementioned 6-helical bundle. The X-ray analysis shows that there are significant differences between them. Please refer to the following "SC34" and "C34" N36 "interaction". The main results are as follows: (1) C34 "N36"interaction site" existing "collocation". (2) the external position of 6-helical bundle, the field of solvent contact (b, f, c, g), the formation of α-helicity and water-soluble upward target, the position of Glu and the position of Lys in the field of solvent contact (b, f, c, g). The synthesis of SC34, C34, water solubility up and down, anti-HIV activity test, anti-HIV activity test, anti-C-peptide activity test, anti-C-peptide activity test, anti-DNA activity test, anti-IC_<50>=1.0nM activity test and so on. The resistant HIV strains of SC34, TMel and TMel 20 were resistant to antibiotics. The results of the test results, we will make sure that we do not need to make a decision, and we can use the HIV-cell fusion inhibitor to make a good decision.