DDS基盤技術を駆使した新規粘膜ワクチン戦略の構築

利用DDS基础技术构建新型粘膜疫苗策略

基本信息

批准号：
13226063
负责人：
堤康央
金额：
--
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

膜融合リポソーム(FL)は、本来気道粘膜に吸着・感染するセンダイウイルス(HVJ)の細胞膜付着・融合能のみをリポソームに付与したものであり、機能面で細胞膜結合・融合能を有した安全なバイオ・ナノキヤリアである。このFLの細胞質内物質導入ベクターとしての有用性・安全性をin vitro、in vivoにおいて今年度まで継続的評価を行ってきた。その結果、FLは殆ど全ての細胞に対して、細胞傷害性を示す事なく、リポソーム内に封入可能であれば、分子(抗原蛋白質・遺伝子)・粒子(機能性ナノ粒子)といった形状やその物理化学的性質に依存する事なく、如何なる物質をも効率よく細胞質内へ、一挙かつ直接導入出来る事を見い出した。即ちFLは、1)細胞内への物質導入に非効率なエンドサイトーシス経路を介する陽電荷リポソーム等の、従来までの細胞内物質導入キャリアよりも細胞内への物質(遺伝子・蛋白質等)導入効率や安全性の点ではるかに優れている。2)粘膜付着性を有する、3)HVJは元々ヒトに対して病原性を示さないうえ、事前に紫外線照射等によりHVJ自身のゲノムRNA遺伝子を完全に断片化しておく為、ウイルスベクターとは異なり安全性が高度に保証されている、4)内封された蛋白質や遺伝子に高い生体内安定性(プロテアーゼ回避能)を付与できるといった、粘膜ワクチン用の抗原デリバリー型アジュバントとして好都合な特性を有する事を明らかとした。以上の基盤的研究成果をもとに、粘膜ワクチン用のアジュバントとしてFLの有用性を経鼻投与により評価したところ、内封したOVA等のモデル抗原を効率よく鼻腔組織の上皮細胞やMac-1陽性細胞、NALTのM細胞に送達出来る事、その結果基礎的重要情報として、in vivo鼻腔粘膜面において強い抗原特異的IgAを誘導し、かつ全身系で十分な抗原特異的IgGをも誘導し得る事等を、当初計画通り見いだした。

膜融合脂质体（FLS）是唯一连接和融合到仙台病毒（HVJ）的细胞膜的能力，该能力最初吸附并感染呼吸道粘膜，脂质体，脂质体，并具有安全的生物 - 纳米卡里亚人，具有安全性的细胞膜结合和融合能力，其功能性具有功能性。直到这个会计年度，该FL作为引入细胞质物质的载体的有用性和安全性已在体外和体内进行了持续评估。结果，我们发现FL可以一次性地将任何物质一次性地转移到细胞质中，只要它可以封装在脂质体内而不依赖于分子（抗原蛋白，基因），颗粒（功能性纳米颗粒）及其物理性属性的分子（抗原蛋白质，基因）的形状，而不是物理学的属性，并且蛋白质，基因）和颗粒。换句话说，与传统的细胞内物质感染载体相比，FL在细胞中的效率和安全性要好得多。 2）它具有粘膜粘附，3）HVJ最初对人类没有致病性，并且由于HVJ本身是由于紫外线照射等的完全碎片，因此，它是高度保证的，它是高度保证的安全性，与病毒载体不同，4）它能够赋予体内稳定性（蛋白酶撤离能力），以使其具有较高的特性，以使其在探索型和基因的效果上，并且它已成为该效果，并且它已成为该效果，并且它已成为该效果，并且它已成为该效果，并且它具有该特性。粘膜疫苗。 Based on the above-mentioned basic research results, we evaluated the usefulness of FL as an adjuvant for mucosal vaccines by nasal administration, and found that model antigens such as encapsulated OVA can be efficiently delivered to epithelial cells of nasal tissue, Mac-1-positive cells, and NALT M cells, and as a result, as basic important information, it was possible to induce strong antigen-specific IgA in the nasal粘膜表面以及按计划在全身系统中诱导足够的抗原特异性IgG。