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薬物治療の最適化に叶う粘膜ワクチン戦略の創出

创建粘膜疫苗策略以优化药物治疗

基本信息

批准号：
14021058
负责人：
堤康央
金额：
$ 3.84万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14021058/
关键词：
膜融合リポソーム粘膜ワクチンアジュバント HVJ DDS ナノテクノロジー

项目摘要

申請者は今年度も含め、膜融合リポソーム(FL)【センダイウイルス(HVJ)の細胞膜付着・融合能のみを付与したリポソーム】の細胞質内物質導入ベクターとしての有用性・安全性を評価してきた。その結果、FLは殆ど全ての細胞に対して、細胞傷害性を示すことなく、リポソーム内に封入可能であれば、分子(抗原蛋白質・遺伝子)・粒子(機能性ナノ粒子)といった形状や物理化学的性質と無関係に、如何なる物をも効率よく細胞質内へ一挙かつ直接導入出来ることを見出した。即ちFLは、(1)細胞内への物質導入に非効率なエンドサイトーシス経路を介する従来までの細胞内物質導入キャリアよりも物質導入効率や安全性の点ではるかに優れている、(2)粘膜感染するHVJを使用しているため、粘膜付着性を有する、(3)HVJは元々ヒトに対して病原性を示さないうえ、事前に紫外線照射等によりゲノムRNA遺伝子を完全に断片化しておくため、ウイルスベクターとは異なり安全性が保証されている、(4)内封物に高い生体内安定性を付与できるといった、粘膜ワクチン用の抗原デリバリー型アジュバントとして好都合な特性を有することを明らかとした。以上の基盤的研究成果をもとに、粘膜ワクチン用の抗原デリバリー型新規アジュバントとしてのFLの有用性をさらに評価した結果、FLを適用することで鼻腔リンパ組織に存在するM細胞、鼻腔上皮細胞、Mac-1陽性細胞へ効率よく抗原送達できることが確認された。またFLは、粘膜上皮細胞のMHCクラスII分子の発現を増強するなど、アジュバント活性をも併せ持つを明らかとした。これらの結果を反映し、FLを用いて抗原蛋白質を経鼻免疫することで、投与粘膜面・全身において強い抗原特異的抗体・細胞障害性T細胞が誘導できた。また遠隔の粘膜面である糞便中にも抗原特異的IgAが検出された。以上の成果・知見をもとに、現在さらに詳細な検討を進めている。

The applicant has evaluated the usefulness and safety of cytoplasmic substance introduction into the cell membrane of HVJ (FL). The results showed that FL could be completely encapsulated in the cytoplasm, that cytotoxicity could be demonstrated, that molecules (antigenic proteins) and particles (functional particles) could be encapsulated in the cytoplasm, that shape and physicochemical properties were irrelevant, and that the efficiency of the substances could be directly introduced into the cytoplasm. That is,(1) substance introduction into cells without efficiency or safety,(2) HVJ use in mucosal infection, mucosal adhesion,(3)HVJ pathogenicity,(4) The high in vivo stability of the inner enclosure and the high in vivo stability of the antigen used in the mucosal membrane are required to ensure the safety of the RNA gene. The results of the study on the above substrates confirmed the presence of M cells, nasal epithelial cells and Mac-1 positive cells in the nasal cavity, and the usefulness of FL in the detection of new antigens for mucosal cell types. The expression of MHC II molecules in FL and mucosal epithelial cells increased, and the activity of MHC II increased. These results are reflected in the induction of antigen-specific antibodies and cell-damaging T cells by administration of antigen-specific proteins to the mucosal surface and the whole body. Antigen-specific IgA was detected in feces from distant mucosal surfaces. The above results are known and discussed in detail.