粘膜ワクチンへの基礎研究:HIV特異的分泌型IgA誘導型アジュバント開発

粘膜疫苗基础研究：HIV特异性分泌型IgA诱导佐剂的开发

• 批准号: 13226074
• 负责人: 清野 宏
• 金额: --
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13226074/
• 关键词: 粘膜免疫; 粘膜ワクチン; 粘膜アジュバント; HIVワクチン; キメラ型無毒化毒素; 経口免疫; 経鼻ワクチン; IgA

粘膜免疫システムを駆使してHIVに対する第一線のバリアを構築する為に、経口・経鼻ワクチンが有効であり、その鍵を握っているのが粘膜免疫増強効果のある粘膜アジュバントの開発である。そこで、本研究計画ではHIV粘膜ワクチンに向けて新規アジュバント開発の為の基礎研究を展開している。新規粘膜アジュバントとして、我々が開発したmCT、E112Kの免疫増強作用の有効性をさらに改良する為に、B. choshinensis発現ベクターを使ってE112Kのm112KのmCT-Aサブユニットと病原性大腸菌由来易熱性毒素のLT-Bサブユニット遺伝子(pNCMO2-LTB-mCTA)を発現しているキメラ型アジュバントの作成に成功している。つまり、CT-Bに比較してLT-Bが宿主細胞の発現する多数のリガンド分子(GM1,asialoGM1,GM2)に結合できる特徴をいかして、粘膜上皮細胞へのワクチン抗原などの送達効果増強が期待できる。Bc-mCT-A/LT-Bキメラ型アジュバントの安全性と免疫増強効果はin vivo, in vitro実験系両方を駆使して検討した。毒性試験に関しては、腸管傑紮ループ試験、cAMP誘導性試験、ADPリボシルトランスフェラーゼ試験、CHO試験を併用してその安全性を確認することができた。さらに、タンパク性ワクチン抗原とキメラ型を混合して経鼻免疫するとワクチン特異的IgAとIgG抗体が粘膜系と全身系免疫システム両方に誘導された。次に、ワクチン抗原としては霊長類でのSHIVを使った感染防御免疫誘導実験を踏まえて、HIVgp160,env, p55などのワクチン抗原としてBc-mCT-A/LT-B(またはmCT)と混合したものを実験用マウスに経鼻・経口投与してHIV特異的免疫応答の誘導を粘膜系と全身系免疫機構で比較・検討する実験を現在進めている。特にHIV抗原特異的分泌型IgA (例:生殖器や腸管分泌液、唾液)と血清IgGサブクラス抗体の誘導とその中和効果を検討している。さらに新規ハイブリッド型FLのHIV経鼻ワクチンへの応用についても検討中である。

The development of mucosal immune enhancement effects in the development of mucosal immune systems is the result of the establishment of the first line of HIV response, the development of mucosal immune systems, and the development of mucosal immune systems. This research project aims to conduct basic research on HIV mucosal infection and development. New regulations on the development of mCT, E112K and its effectiveness in enhancing immunity. Choshinensis mCT-A and LT-B of E112K and m112K were successfully developed and purified. Compared with LT-B, CT-B binds to most of the protein molecules (GM1, asialoGM1, GM2) in host cell expression, and the delivery of antigen to mucosal epithelial cells is expected to increase. Safety and immune enhancement of Bc-mCT-A/LT-B vaccine in vivo, in vitro The safety of the combination of toxicity test, intestinal cell test, cAMP inducible test, ADP release test and CHO test was confirmed. In addition, the immune system is induced by a mixture of IgA and IgG antibodies specific to the nasal immune system and the systemic immune system In addition, HIV gp160,env, p55 and HIV gp160,env, p55 can be used to induce HIV specific immune responses in both mucosal and systemic immune systems. In particular, HIV antigen-specific secretory IgA (e.g., genital, intestinal secretions, saliva) and serum IgG antibody induction and neutralization effects are discussed. The new regulation is aimed at preventing HIV infection.

项目成果

Ohmura, M., Kiyono, H.et al.: "Highly purified mutant E112K of cholera toxin elicits protective lung mucosal immunity to diphtheria toxin"Vaccine. 20. 756-762 (2001)

Ohmura, M., Kiyono, H.等人：“高度纯化的霍乱毒素突变体 E112K 引发对白喉毒素的保护性肺粘膜免疫”疫苗。

Hodge, L.M., Kiyono, H.et al.: "IgA responses and IgE associated inflammation along the repiratory tract after mucosal but not systemic immunization"Infect. Immun.. 69. 2328-2338 (2001)

Hodge, L.M., Kiyono, H.等人：“粘膜免疫后沿呼吸道的 IgA 反应和 IgE 相关炎症，但不是全身免疫”感染。

Kim, J-K., Kiyono, H.et al.: "Influence of enterotoxin on mucosal intranet : selective inhibition of extrathymic T cell development in intestinal intraepithelial lymphocytes by oral exposure to heat-labile toxin"Eur. J. Immunol. 31. 2960-2969 (2001)

Kim, J-K., Kiyono, H.等人：“肠毒素对粘膜内网的影响：通过口服不耐热毒素选择性抑制肠上皮内淋巴细胞中胸腺外 T 细胞的发育”Eur。

Kim, J-K., Kiyono, H.et al.: "T cell receptor dynamism of mucosal and systemic CD4^+ T cells in the course of an immune response to Escherichia coli heat-labile enterotoxin"J. Infect. Dis.. 184. 43-51 (2001)

Kim, J-K., Kiyono, H.et al.：“在对大肠杆菌不耐热肠毒素的免疫反应过程中粘膜和全身 CD4^ T 细胞的 T 细胞受体动态”J.

Jones, H.P., Kiyono, H.et al.: "The pulmonary enviroment promotes Th2 cell responses after nasal-pulmonary immunization with antigen alone, but Th1 responses are induced during instances of intense immune stimulation"J. Immunol. 167. 4518-4526 (2001)

Jones, H.P.、Kiyono, H.等人：“仅用抗原进行鼻肺免疫后，肺部环境会促进 Th2 细胞反应，但在强烈免疫刺激的情况下会诱导 Th1 细胞反应”J.