アミロイド前駆体蛋白質糖鎖変化の老人斑形成における意義

淀粉样前体蛋白聚糖变化在老年斑形成中的意义

• 批准号: 13771406
• 负责人: 萬谷 博
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 2002
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13771406/
• 关键词: アルツハイマー病; 家族性アルツハイマー病; アミロイド前駆体蛋白質; アミロイドβ; アスパラギン結合型糖鎖

糖蛋白質上の糖鎖は蛋白質の物性や相互作用に影響し、分解酵素等に対する感受性を変化させることが知られることから、アルツハイマー病(AD)においてもアミロイド前駆体蛋白質(APP)の糖鎖変化がAPP異常代謝の要因となる可能性が考えられる。そこで、APP代謝異常への糖鎖の関与について検討した。まず、家族性ADに見られるアミノ酸変異によりAPPの糖鎖が変化するか調べるため、正常型(Wt)と2種類の変異型APP695[ロンドン型(DF):Val642Phe、スウェーデン型(DNL):Lys595Asn/Met596Leu]を神経由来培養細胞で発現し、各APPのN-結合型糖鎖を分析した。その結果、正常型に比較して変異型ではbisecting GlcNAc型糖鎖が約8倍、Fucose型糖鎖が約2〜3倍も多いことが明らかとなった。この糖鎖変化は2つの変異型に共通していることから、bisecting GlcNAcとFucoseの増加がAβの産生増加に関与する可能性が示唆された。また、弧発性ADにおいてもAPPの糖鎖変化によりAPPの代謝異常が誘導されている可能性が考えられる。そこで、糖転移酵素の発現を細胞レベルで制御し特定の糖鎖を持つAPPを発現させるような、糖鎖リモデリングの実験系を作成し、bisecting GlcNAcやFucose付加のAPP代謝への影響を検討することを試みた。bisecting GIcNAcの生合成に関わる酵素、mannosyl(β-1,4)-glycoprotein β-1,4-N-acetylglucosaminy ltransferase III(GnT-III)遺伝子を神経由来培養細胞に導入し、恒常的にGnT-IIIを発現する細胞を作成した。この細胞のGnT-III活性は遺伝子導入前の約300倍に上昇した。また、bisecting GlcNAcを認識するレクチン(E-PHA)により、bisecting GlcNAc型糖鎖が高頻度に発現することを確認した。現在、この細胞を用いてAPPの糖鎖変化とAβ産生との関係を解析している。

Glycoprotein physical interaction, degradation of enzyme sensitivity, etc. to change the knowledge of the disease (AD) in the absence of protein precursor (APP) glycoprotein change to APP abnormal metabolism of the possibility of change The relationship between sugar lock and APP metabolism abnormality is discussed. The N-linked glycoplocks of APP were analyzed for the generation of APP695 [DF:Val642Phe, DNL:Lys595Asn/Met596Leu] from cultured cells. As a result, the normal type is about 8 times more than the normal type, and the Fucose type is about 2 ~ 3 times more than the normal type. The possibility of increasing the production of Aβ by bisecting GlcNAc and Fucose is indicated. The possibility of abnormal metabolism of APP induced in the presence of AD is examined. This study was conducted to investigate the effects of GlcNAc and Fucose addition on APP metabolism in the production of glucose shift enzymes, and the development of specific glucose shift enzymes and APP metabolism. bisecting GIcNAc biosynthesis enzymes, mannosyl(β-1,4)-glycoprotein β-1,4-N-acetylglucosaminyltransferase III(GnT-III) gene is introduced into cultured cells and a constant GnT-III gene is produced. The GnT-III activity of these cells increased approximately 300 times compared to before gene introduction. It is confirmed that bisecting GlcNAc occurs frequently. Now, the relationship between APP glycation and Aβ production is analyzed.