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組換えCDVの作出によるCDV‐M蛋白の機能解析と新型ウイルスワクチンの開発

CDV-M蛋白的功能分析及通过产生重组CDV开发新病毒疫苗

基本信息

批准号：
02J08470
负责人：
上間匡
金额：
$ 1.92万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2002
资助国家：
日本
起止时间：
2002 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02J08470/
关键词：
イヌジステンパーウイルス組換えウイルスワクチン Mタンパク

项目摘要

ホタル由来のルシフェラーゼ遺伝子を発現する組換えイヌジステンパーウイルス(CDV)を用いて、組換えCDVベクターにおける外来遺伝子発現の制御機構について解析を行った。組み換えCDVベクターでは主に、転写制御配列ではなく、ウイルスゲノム上流に近い位置にある遺伝子ほど遺伝子発現が大きくなるというpolar attenuationより外来遺伝子の発現がコントロールされていることを明らかにした。また、これを利用して組換えCDVベクターにおいて外来遺伝子の発現量をコントロールすることが可能であり、組換えCDVが遺伝子ベクターとして将来利用できることを示した。新型CDVワクチン候補として、M遺伝子欠損組換えCDVの作出を行った。M蛋白はウイルス粒子形成・出芽に重要とされ、M遺伝子に欠損や変異を持つウイルスは感染細胞からの正常なウイルス粒子の放出がないことが他のウイルスで知られている。人為的にM遺伝子を欠損したウイルスは感染細胞からウイルスが排出されないために高い安全性が期待され、新しいワクチン候補として有用であると考えられ、CDV国内分離株を基に、M遺伝子を欠損させ、かわりに蛍光蛋白EGFP遺伝子を挿入したM遺伝子欠損組換えCDVを作出した。観察により組換えCDVは細胞間を直接伝播していると考えられ、ウイルス放出のない新たな組換え生ワクチン候補として有用と考えられた。また、EGFPにより可視化されたウイルスは、細胞、動物への感染後の追跡が可能であり、今後の基礎研究に有用なツールになると期待できる。

ホタル来のルシフェラーゼ伝子を発行成する组组选えイヌジステンパーウイルス(CDV)を Use the いて, group replacement えCDV ベクターにおけるforeign legacy 伝子発 appear の control mechanism について analytic を行った. The set of CDV's ベクターでは主に, the 転WRITING control arrangement ではなく, and the ウイルスゲノムUpstream に near い position にある伝子ほど伝子発 appear が大きくなるというpolar attenuation より Foreign legacy 伝子の発 appear がコントロールされていることを明らかにした.また, これをUse して to replace えCDV ベクターにおいて Foreign legacy 伝子の発existing amount をコントロールすることがpossibleであり、Change the CDVが弝子ベクターとしてUse the できることをshowした in the future. The new CDV candidate is the candidate, and the CDV is the replacement for the missing group. M protein is important for particle formation and budding.は Infected cells からのなウイルス particles の release がないことがのウイルスで知られている. Artificial にM legacy 伝子を无码したウイルスは infected cells からウイルスがexcretionされHigh security, high expectations, new ones, candidate, useful onesと考えられ, CDV domestic isolates をbaseに, M 伝子を无码させ, かわりに蛍光protein EGFP 伝子をinsert したM 伝子杝子杒综合综合duct えCDVをmade した. Observation of the combination of CDV and intercellular transmission of CDV directly Raku released a new one and replaced it with a new one, a new candidate, a useful one.また、EGFPによりvisualizationされたウイルスは、cells、animalsへのafter infection It is possible to trace the possibility, and it is expected that basic research will be useful in the future.