Funktionelle Analyse der U6 snRNA-spezifischen Terminal-Uridylyl-Transferase

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Das Ziel des Vorhabens ist es, die U6-snRNA spezifische Terminal-Uridylyl-Transferase im Detail zu charakterisieren und letztlich zu klonieren. Zunächst werden dazu die katalytischen Eigenschaften dieses RNA-modifizierenden Enzyms untersucht. Anschließend wird das Enzym zur Homogenität gereinigt und ansequenziert. Mit Hilfe der erhaltenen Sequenzinformation wird die zugehörige Gensequenz ermittelt, kloniert und das rekombinante Protein exprimiert. Mit Hilfe von spezifischen gegen die TUTase gerichteten Antikörpern soll die Bedeutung dieser U6-snRNA-Modifizierung für den Mechanismus des prä-Messenger-RNA-Splicens untersucht werden. Darüber hinaus stellt die Bindung der TUTase an die U6-snRNA ein Modellsystem für eine transiente RNA/Protein-Wechselwirkung dar und soll hinsichtlich ihrer strukturellen Prinzipien charakterisiert werden.