口腔癌の診断・治療へのレーザーマイクロダイセクションとマイクロアレイの応用-口腔癌診断アレイの開発にむけて-

激光显微切割和微阵列在口腔癌诊断和治疗中的应用 - 致力于口腔癌诊断阵列的开发 -

• 批准号: 14771009
• 负责人: 入江 太朗
• 金额: $ 1.98万
• 依托单位: Showa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771009/
• 关键词: マイクロダイセクション; マイクロアレイ; 口腔癌; 悪性腫瘍; 遺伝子発現; 口腔扁平上皮癌

【研究の経過】1)口腔扁平上皮癌手術材料の形態学的解析:ホルマリン固定手術材料をパラフィン標本作製し、臨床病理学的解析を行った。必要に応じ、特殊染色や免疫染色を行い、分子生物学的解析結果との対比のためのデータを揃えた。また、解析に用いた症例は、臨床経過・検査データ・手術所見・経過に関するデータを保存した。2)Laser microdissection(LM)標本作製:LMに用いるための処理を施したスライドグラスを使用し、8μmで凍結切片の薄切を行った。ステップセクションで一枚おきにHE染色標本を作製しておく。薄切標本は-40℃で保存した。3)Laser microdissection(LM)とReal time PCR法による解析:Microarrayの結果がLaser microdissectionによるサンプリングにより影響を受ける可能性があるため、適正なサンプリング数・部位の検討を行った。すでに申請者により第11回日本口腔病理学会で報告された、口腔癌において発現が確認されている転写産物を用いて、口腔癌手術材料よりDissectionされた細胞よりReal time PCRを行った。4)Laser microdissection(LM)とMicroarrayを用いた解析:前項で検討された最適なサンプリング数・部位を用いてLaser microdissectionにより得られたmRNAを用いて網羅的解析を行った。【研究結果】口腔扁平上皮癌の組織発生あるいは浸潤・増殖・転移に大きな役割を果たしている可能性を示唆する様々な遺伝子が明らかとなった。これまでの研究結果から口腔癌における生物学的性格を反映し得る遺伝子の候補が明らかとなった。今後はこれらの結果をもとに様々な統計学的アルゴリズムを用いてさらに遺伝子の数を絞り、低コストな口腔癌診断アレイの開発を行う。【学会発表】1)第20回 「歯科医学を中心とした総合的な研究を推進する集い」 4)第63回 日本癌学会総会2)第92回 日本病理学会総会 ランチョンセミナー 5)第48回 日本唾液腺学会3)第92回 日本病理学会総会 ワークショップ 6)第58回 日本口腔科学会総会 ミニシンポジウム

1) Morphological analysis of surgical materials for oral squamous cell carcinoma: preparation of fixed surgical materials, analysis of clinical pathology If necessary, special staining and immunostaining will be performed, and the results of molecular biology analysis and comparison will be completed. The analysis of clinical data, clinical data, surgical findings, and related data are preserved. 2)Laser microdissection(LM):LM is used for processing, and 8μm frozen slices are used for thinning. The color of the paper is red. Thin-cut plums are preserved at-40℃. 3)Analysis of Laser microdissection(LM) and Real time PCR:Microarray results from Laser microdissection (LM) and Real time PCR are affected by the possibility of microdissection, and the appropriate microdissection is affected by the number of microdissection sites. The 11th Japanese Society of Oral Pathology reports that oral cancer has been identified as a "Real time" PCR product for oral cancer surgery. 4)Laser microdissection(LM) and Microarray are used in the analysis of the first paragraph. [Results] Tissue development of oral squamous cell carcinoma may indicate the possibility of invasion, proliferation, metastasis, and metastasis. The results of this study show that the biological characteristics of oral cancer are reflected in the candidate genes. In the future, the results of this study will be analyzed statistically, and the number of patients will be reduced to 100. [Society Development Table] 1) 20th "Research Progress of Dental Medicine Center" 4) 63rd Japan Cancer Society General Meeting 2) 92nd Japan Pathological Society General Meeting 5) 48th Japan Salivary Gland Society 3) 92nd Japan Pathological Society General Meeting 6) 58th Japan Stomatological Society General Meeting

项目成果

Expression of adenomatous polyposis coli (APC) in tumorigenesis of human oral squamous cell carcinoma

• DOI: 10.1016/j.oraloncology.2004.04.011
• 发表时间: 2004-10-01
• 期刊: ORAL ONCOLOGY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Tsuchiya, R;Yamamoto, G;Tachikawa, T
• 通讯作者: Tachikawa, T

A new moleculary-biological approach in the morphology-basic method and application of the laser microdissection

形态学基础方法中的一种新的分子生物学方法及其激光显微切割的应用

• 发表时间: 2004
• 期刊: Med Electron Microsc 37(2)
• 作者: Nagoshi Y;Yamamoto G;Yan Wang;Katsuta H;Aida M;Yanaihara A;J.Watahiki;Yukiko Maeda;Tachikawa T
• 通讯作者: Tachikawa T

Irie T, Aida T, Tachikawa T: "Gene expression profiling of oral squamous cell Carcinoma using laser microdissection and cDNA microarray."Med Electron Microsc. 37(2)(in press). (2004)

Irie T、Aida T、Tachikawa T：“使用激光显微切割和 cDNA 微阵列对口腔鳞状细胞癌进行基因表达谱分析。”Med Electron Microsc。

Irie T, Tachihawa T: "Genetic diagnosis of oral cancer using laser microdissection and cDNA microarray."JJADS. 23(in press). (2004)

Irie T、Tachihawa T：“使用激光显微切割和 cDNA 微阵列对口腔癌进行基因诊断。”JJADS。

Gene Expression profiling of oral squamous cell carcinoma using laser microdissection and cDNA microarray.

使用激光显微切割和 cDNA 微阵列对口腔鳞状细胞癌进行基因表达谱分析。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Med Electron Microsc 37(2)
• 作者: Irie T