肝薬物代謝酵素レベルに影響を及ぼす核内受容体CAR遺伝子の発現制御機序の解明

阐明影响肝脏药物代谢酶水平的核受体CAR基因的表达控制机制

• 批准号: 14771320
• 负责人: 吉成 浩一
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: University of Shizuoka
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14771320/
• 关键词: 薬物代謝酵素; チトクロームP450; CYP3A; 肝臓; 肥満; モデル動物; 核内受容体; 転写調節; 酵素誘導; 肝; 糖尿病

本研究では、ヒトの肥満に近いと考えられる高脂肪食負荷マウスを用いて、肥満に伴う肝チトクロームP450(P450)分子種の変動について解析した。この肥満マウスでは、白色脂肪組織量の増加に伴い体重が増加し、また、血中のグルコースおよび総コレステロール濃度は対照群に比べて有意に高かった。さらに、肝細胞中の中性脂肪含量も有意に増加していた。肝薬物代謝能の変化を調べるために肝ミクロソーム画分の総P450含量を測定したところ、肥満動物では対照群の60%に低下していた。次に、ウェスタンブロットおよび逆転写PCRにより各P450分子種のタンパクおよびmRNAレベルの変動を測定した。その結果、CYP3Aサブファミリー分子種(CYP3All)がほぼ選択的に減少していることが明らかとなり、そのタンパク含量およびmRNAレベルは対照群のそれぞれ18%および15%であった。CYP3Aにより触媒されるエリスロマイシン脱メチル化活性も、肥満マウスでは対照マウスの4分の1に低下していた。また、CYP2Cサブファミリー分子種にもタンパクおよびmRNAレベルの若干の低下が認められた。なお、既に報告されている肥満や糖尿病に伴うCYP2Elの増加は本モデルマウスにおいても確認された。CYP3A遺伝子の発現調節には核内受容体の肝特異的転写因子-4やプレグナンX受容体が重要な役割を果たしていることが報告されている。そこで、これらのmRNAレベル、核内タンパク量、CYP3Allプロモーター結合能を測定した。しかしながら、いずれにおいても両群間で顕著な差は認められなかった。CYP3Aは多くの医薬品の代謝に関わる重要な分子種であることから、ヒトの肥満でも同様な現象が認められた場合、臨床上大きな問題となると考えられる。現在、この肥満に伴うCYP3A分子種の発現低下に関与する転写因子およびプロモーター領域の同定を試みている。

This study uses いて, fat The molecular species of P450 (P450) is analyzed by analyzing the molecular species of the liver.この发満マウスでは, white adipose tissue volume のincrease にassociated with body weight がincrease し, また, in the blood The concentration of the のグルコースおよび総コレステロール concentration is higher than the concentration of the べて intentional に高った. Therefore, the neutral fat content in liver cells is intentionally increased. Liver juice metabolizable energy change べるためにgan ミクロソーム画分の総P450 The content of the product is measured in 60% low-fat and low-fat products. The PCR test was performed in reverse for each P450 molecular species of the ウェスタンブロットおよび, and the およびmRNA レベルの変动を was measured.そのRESULTS, CYP3A サブファミリーmolecule species (CYP3All) がほぼ选択's にREDUCED していることが明らかとなり, そのタンパクcontent およびmRNAレベルは対毾恮それぞれ18%および15%であった. CYP3A catalytic catalytic activity Sex も, fat 満マウスでは対毾曦スの4 points の1にlow していた.また、CYP2C サブファミリーmolecule species にもタンパクおよびmRNA レベルの slightly low recognition められた.なお、Jiにreportされているfat満やdiabetesに与CYP2Elのincrease+は本モデルマウスにおいてもconfirmされた. The CYP3A gene is an important factor that regulates the liver-specific transcription factor-4 receptor in the nuclear receptor. Measurement of DNA content, RNA content, nuclear DNA content, and CYP3All protein binding energy.しかしながら、いずれにおいても両between the group and the difference between the group and the められなかった. CYP3A is an important molecular species in the metabolism of medicinal products and is used in the metabolism of medicinal products. The phenomenon of obesity and obesity is not recognized in the situation, and it is a major clinical problem. Now, the low level of the CYP3A molecule species and the low level of the factor are now determined in the field.