GFPトランスジェニックマウスを用いたエストロゲンの脳への作用機構の解明

使用 GFP 转基因小鼠阐明雌激素对大脑的作用机制

• 批准号: 14780571
• 负责人: 松田 賢一
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyoto Prefectural University of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 2003
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14780571/
• 关键词: エストロゲン; トランスジェニック; GFP; 神経内分泌; エストロゲン受容体; 性差; 性行動; 生細胞; 性ホルモン

エストロゲンは性行動や性腺ホルモンの分泌制御などの性差のみられる脳機能に対してのみでなく、脳を守り、維持するといった、より一般的な機能に対しても非常に大切な因子であることが明らかになってきている。本研究ではエストロゲンの作用に伴い、脳神経細胞にどのような構造的変化がもたらされ、その結果、どのような機能的変化が生じるのかを明らかにするために、マウスERα遺伝子プロモーター(6.0Kb)の下流にEGFP遺伝子cDNAを繋ぐ形の遺伝子のトランスジェニック(TG)マウスの作成を行った。得られた7つのTG系統のうち3系統において視床下部、中隔、分界条床核、扁桃体や線条体など、これまでにERαを発現すると報告されている領域でGFP陽性の神経細胞の分布が確認された。これらのGFP陽性の細胞が実際にERαを発現しているかを蛍光免疫染色で確認したところ、その多くは実際にERα免疫陽性であった。性ホルモンを枯渇することにより、ERα陽性神経細胞の形態が変化するかどうかを、卵巣摘除を行ったTGマウスの脳組織を解析したところ、卵巣摘除を行うとGFP陽性の細胞が増加する脳領域と変化の見られない領域があることがわかった。また、増加の見られた領域では神経細胞体が小さくなり、変化のみられなかった領域では逆に大きくなることを明らかにした。さらに、このTGマウスの胎児脳を分散培養または新生児脳をスライス培養して、ホルモン環境の変化に伴うERα陽性神経細胞の形態・機能の変化をGFPの蛍光を指標に試験管で生きた細胞・組織を用いて解析する系を確立した。これらの結果を2002年度国際神経内分泌学会、CREST「脳ニューロステロイド作用を攪乱する環境ホルモン」研究会、2003年度神経科学会、解剖学会および神経内分泌学会で発表し注目を集めた。

Sexual activity, gonadal sex, sex and sex. The purpose of this study is to analyze the effects of the chemical agents, the results of the experiments, the results of the experiments, and the results of the The results show that the lower part of the TG system, the septum, the demarcation core, the tonsillar body, the tonsil, the tonsil, the The results of GFP immunostaining showed that ER α immunoreactivity was not detected in ER α cells. Sex workers, women, women In the field of science and technology, there are many problems in the field, such as the size of the body, the size of the field. The tissue of the newborn baby was established with the aid of an analytical device, the tissue of the newborn baby, the mother, the baby, the baby, the The results showed that the International Society of Endocrinology, the CREST Society of Endocrinology, the Society of Divine Sciences and the Society of Anatomy, the Society of Endocrinology and Endocrinology of the Society of Anatomy showed great concern.

项目成果

松田 賢一: "初めてでもできる共焦点顕微鏡活用プロトコール"羊土社. 18 (2004)

Kenichi Matsuda：“即使是初学者也可以使用的共聚焦显微镜协议”Yodosha 18 (2004)。

Ikuo Ochiai: "Imaging analysis of subcellular correlation of androgen receptor and estrogen receptor α in single living cells using green fluorescent protein color variants"Molecular Endocrinology. 18. 26-42 (2004)

Ikuo Ochiai：“使用绿色荧光蛋白颜色变体对单个活细胞中雄激素受体和雌激素受体α的亚细胞相关性进行成像分析”《分子内分泌学》18. 26-42 (2004)。

Y.Oshima: "Behavior of graft host cells in underlying sub-chondral bone after transplantation of osteochoudral"Microscopy Research and Technique. 58. 19-24 (2002)

Y.Oshima：“骨软骨移植后移植宿主细胞在软骨下骨中的行为”显微镜研究和技术。

Mitsuhiro Kawata: "Sex hormone receptors and brain cell structure"Clinical Pediatric Endocrinology. 11. 25-30 (2002)

川田光宏：《性激素受体与脑细胞结构》临床儿科内分泌学。

K.I.Matsuda: "Colocalization and ligand-dependent discrete distribution of the estrogen receptor (ER)α and ERβ"Molecular Endocrinology. 16. 2215-2230 (2002)

K.I.Matsuda：“雌激素受体 (ER)α 和 ERβ 的共定位和配体依赖性离散分布”分子内分泌学。 16. 2215-2230 (2002)