出芽酵母プロテインホスファターゼの機能ゲノム科学

酿酒酵母蛋白磷酸酶的功能基因组学

• 批准号: 02F00523
• 负责人: 原島 俊
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: Osaka University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-02F00523/
• 关键词: 酵母; プロテインホスファターゼ; 増殖

ワクシニアウイルスのプロテインホスファターゼVH1のホモログである出芽酵母(Saccharomyces cerevisiae)のdual-specificityプロテインホスファターゼYvh1は、細胞増殖や胞子形成に関与することが知られている。YVH1遺伝子の破壊株は、30℃で増殖遅延、13°で増殖欠損の表現型を示す。Δyvh1破壊株が示す増殖欠損・増殖遅延表現型がどのようなメカニズムによって引き起こされているかを明らかにするために、Δyvh1破壊株から、30℃での増殖遅延表現型が抑圧された抑圧変異株を33株分離した。遺伝解析の結果、それらは、全て同じ遺伝子に起こった変異であり、しかも優性変異であった。この抑圧変異をSVH1(Suppressor of YVH1)と命名した。SVH1の実体を明らかにするため、SVH1抑圧変異株のゲノムDNAからライブラリーを作製し、yvh1破壊株の増殖遅延を回復させるDNA断片をクローン化した。サブクローニングと塩基配列決定によって、SVH1はMRT4遺伝子であることがわかった。また、68番目のグリシンが、アスパラギンへ置換されることによって、yvh1破壊株の増殖遅延表現型が抑圧されていることがわかった。MRT4遺伝子は、mRNA turnoverから名付けられた遺伝子であり、遺伝子破壊によって、いくつかの遺伝子のmRNAの安定性が低下することが知られている。以前に、我々は、Yvh1と相互作用する因子として、Yph1と命名したタンパクを見い出していたが、本研究の途上、Mrt4がNop7(=Yph1)と共沈降することが報告された。そこで、two hybrid法によって、Yvh1とMrt4とに相互作用があるか否かを調べたところ、弱い相互作用が検出された。この結果より、Mrt4は、Yvh1の基質である可能性が考えられたので、次に、リン酸化タンパクであるか否かを解析したが、リン酸化タンパクであるとの証拠は得られなかった。これらの結果より、Mrt4はYvh1の基質ではなく、調節因子であることが示唆された。

The dual-specificity of Saccharomyces cerevisiae is related to cell growth and cell formation. The phenotype of YVH1 progeny was shown at 30 ° C and 13° C. 33 isolates of Δ yvh1 strain were found to have the phenotype of propagation failure and propagation delay. The result of the analysis is that there are differences in the quality of the products. This pressure change was named SVH1 (Suppressor of YVH1). SVH1 gene fragments are isolated from SVH1 gene fragments, SVH1 gene fragments are isolated from SVH1 gene fragments, SVH1 gene fragments are isolated from SVH1 gene fragments and SVH1 gene fragments are isolated from SVH1 gene fragments.サブクローニングと塩基配列决定によって、SVH1はMRT4遗伝子であることがわかった。The phenotype of growth and development of yvh1 plants is suppressed by the substitution of 68 species. MRT4 mRNA turnovers, mRNA turnovers, mRNA turnovers. The former, I, Yvh1, interaction factor, Yph1, naming, and the future of this study, Mrt4, Nop7(=Yph1), and co-precipitation are reported. There are two hybrid methods, the interaction between Yvh1 and Mrt4, and the weak interaction is detected. The result is that the matrix of Mrt4 and Yvh1 is likely to be analyzed. Mrt4 and Yvh1 are the results of the study.

项目成果

Widianto D. et al.: "Creating Saccharomyces cerevisiae haploid strain having 21 chromosomes"J.Biosci.Bioeng.. 95. 89-94 (2003)

Widianto D.等人：“创建具有21条染色体的酿酒酵母单倍体菌株”J.Biosci.Bioeng.. 95. 89-94 (2003)

Auesukaree C. et al.: "Transcriptional regulation of phosphate-responsive genes in low-affinity phosphate-transporter-defective mutants in Saccharomyces cerevisiae"Biochem Biophys Res Commun.. 306. 843-850 (2003)

Auesukaree C.等人：“酿酒酵母低亲和力磷酸盐转运蛋白缺陷突变体中磷酸盐响应基因的转录调节”Biochem Biophys Res Commun. 306. 843-850 (2003)