制限酵素修飾酵素遺伝子の自己増殖

限制酶修饰酶基因的自我繁殖

• 批准号: 03F03103
• 负责人: 小林 一三
• 金额: $ 0.77万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03103/
• 关键词: 制限修飾系; 遺伝子増幅; 遺伝子水平伝達; 利己的遺伝子; 枯草菌; 細菌ゲノム; 細胞死; 自然形質転換能

制限酵素修飾酵素の遺伝子は、ウイルスのような「利己的な動く遺伝子」としてふるまう証拠を、ホスト研究室は蓄積してきた。本研究者は、枯草菌染色体上にある順向き繰り返し配列に挟まれたBamHI制限修飾遺伝子が、タンデムに自己増幅する現象を発見して既に報告した。これは、上の仮説を強くサポートするものであった。この制限修飾遺伝子の自己増殖を、それらの利己的な動く遺伝子としての振る舞いに関連づけるべく、次の研究を行った。(1)制限修飾遺伝子の増幅と伝達の関連。この増幅が、制限修飾遺伝子の自然形質転換(DNAの取込みと組み込み)に因る広がりに貢献するか否かを検討するために、遺伝的に標識した枯草菌株を構築した。ドナーは、インターナルコントロールのマーカー遺伝子と非増幅あるいは増幅のBamHI制限修飾遺伝子を持つ。レシピエントは、独自のマーカー遺伝子とBamHIの対立遺伝子を持つ。この株を使って形質転換を行い、予備的な結果を得た。(2)制限修飾遺伝子の増幅の検出系。制限修飾遺伝子の増幅を検出するために、次の系を構築した。(2-1)ドット・ブロット。感度および精度を検討した。(2-2)サザーン解析。精度の高い定量ができた。(2-3)蛍光レポーター。菌株を構築した。(3)大腸菌での増幅検出系。大腸菌で増幅を検出する系を構築した。(3-1)ドット・ブロット。感度および精度を検討した。(3-2)サザーン解析。精度の高い定量ができた。

Restriction enzyme modification enzyme gene, it's called "self-interest gene" and it's called "self-interest gene." The researchers report that the chromosome of Bacillus subtilis has been amplified by BamHI restriction gene.これは、上の仮说を强くサポートするものであった。This is the first time that we've had a chance to study the relationship between the growth and development of the gene and the evolution of the gene. (1)Limiting the amplitude and reach of modifier vectors. This is a natural change in DNA composition due to the increase in DNA amplification and restriction.ドナーは、インターナルコントロールのマーカー遗伝子と非増幅あるいは増幅のBamHI制限修饰遗伝子を持つ。レシピエントは、独自のマーカー遗伝子とBamHIの対立遗伝子を持つ。The plant quality is changed, and the prepared results are obtained. (2)A detection system for limiting the amplitude of modifier vectors. The structure of the system of limiting the amplitude of the modifier (2-1)ドット·ブロット。Sensitivity and accuracy are discussed. (2-2)The analysis of the problem. High precision and quantitative accuracy. (2-3)蛍光レポーター。Strain construction. (3)E. coli increased amplitude detection system. E. coli growth and development (3-1)ドット·ブロット。Sensitivity and accuracy are discussed. (3-2)The analysis of the problem. High precision and quantitative accuracy.

项目成果

Multiplication of a restriction modification gene complex

限制性修饰基因复合物的增殖

• 发表时间: 2003
• 期刊: Mol.Microbiol 48
• 作者: A.Ino;I.Kobayashi;A.Ino;I.Kobayashi;K.Kusano;N.Handa;Y.Katayama;R.J.Roberts;M.Sadykov
• 通讯作者: M.Sadykov