拟南芥血红素加氧酶基因家族的功能分析-猫眼课题宝

拟南芥血红素加氧酶基因家族的功能分析

批准号：

03F03716

负责人：

河内孝之

金额：

$0.77万

依托单位：

Kyoto University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

财政年份：

2003

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2003 至 2004

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03F03716/

关键词：

シロイヌナズナヘムオキシゲナーゼフィトクロムフィトクロモビリン発色団赤色光光受容体

项目摘要

项目成果

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シロイヌナズナはヘムオキシゲナーゼをコードする4つの遺伝子、AtH01 (HY1)、AtH02、AtH03、AtH04をもつ。この遺伝子ファミリーの遺伝子のうち、AtH01遺伝子がフィトクロム発色団生合成に必須な機能的な酵素をコードすることがわかっているが、他の3つの遺伝子の生物学的な役割分担は未知であった。そこで、遺伝子の発現特異性や遺伝子産物の酵素活性の有無を調べるとともに、遺伝子破壊系統などを利用して生物的な機能解析を進めた。AtH02、AtH03、AtH04遺伝子座へのT-DNA挿入系統を同定し、ホモ接合体系統を得て、それぞれの遺伝子の突然変異体を確立した。そこで、今回得られた変異体に関しての光形態形成表現型を調べた。これまでに、AtH03遺伝子の破壊系統において、根の光屈性に異常が見られ、この遺伝子が根のフィトクロムの発色団生合成に関わる可能性が示された。今後、詳細な解析が必要である。酵素活性に関して、大腸菌で組み換えタンパク質として発現させたH03とH04は、フィレドキシン依存のヘムオキシゲナーゼ活性が検出された。これまでに解析していたAtH01のヘムオキシゲナーゼとは、至適pHやアスコルビン酸依存性が異なっていた。これらの違いの意義を、発現の時期や組織/器官特異性解析の結果を考慮して考察した。植物体を利用した酵素活性の評価を行うため、シロイヌナズナhy1変異体に、AtH02-4遺伝子を構成的なプロモーターを用いて強制発現する系統の解析を進めている。これには、組み換えタンパク質による生化学的解析を補完する意味もある。現在、作成したコンストラクトを用いて、アグロバクテリアを介する形質転換操作を行い、T1種子を獲得した。

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会议论文

The tomato photomorphogenetic mutant, aurea, is deficient in phytochromobilin synthase for phytochrome chromophore biosynthesis.

DOI： 10.1093/pcp/pci062

发表时间： 2005-04

期刊：

Plant & cell physiology

影响因子： 4.9

作者：

[T. Muramoto;C. Kami;H. Kataoka;N. Iwata;P. Linley;Keiko Mukougawa;A. Yokota;T. Kohchi]