アフリカツメガエルにおける新規の神経形成遺伝子の機能解析

非洲爪蟾新型神经源基因的功能分析

• 批准号: 03J11895
• 负责人: 佐藤 礼子
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-03J11895/
• 关键词: Dullard; 神経; アフリカツメガエル; 前腎

アフリカツメガエルやほ乳類培養細胞を用いて、新規遺伝子"Dullard"の機能解析を行った。DullardがBMPシグナル経路を負に調節するホスファターゼであることを明らかにし、その作用機構を明らかにするためにさらに研究を行った。アニマルキャップアッセイやWestern解析などを行った結果、DullardはBMPリガンドによるSmadl/5/8のリン酸化は抑制するが、恒常的に活性型のBMPタイプIレセプターによるSmadl/5/8のリン酸化は抑制しないことを明らかとした。さらにDullardがBMPレセプターの存在量を減少させていることを明らかとした。また、DullardとBMPレセプターとの相互作用についても免疫沈降法を行い解析した。その結果DullardはBMPレセプターと複合体を形成できることが明らかとなった。また、リン酸化タンパク精製を行い、DullardによってBMPタイプIレセプターのリン酸化状態も減少していることを明らかにした。これらのことからDullardはBMPレセプターの脱リン酸化と分解を促進するホスファターゼであり、BMPを負に調節していると考えられる。この内容の一部についてオーストラリアで行われた国際発生生物学会にて発表を行った。さらに現在、論文を作成し、投稿中である。また、アフリカツメガエルにおける前腎形成についても解析を行い、前腎形成に関与する因子の解析を行った。

使用爪蟾和哺乳动物培养的细胞对新基因“ Dullard”的功能分析。我们已经透露，杜拉德是一种磷酸酶，对BMP信号通路进行负调节，并进行了进一步的研究以阐明其作用机理。在进行动物帽测定和西方分析之后，杜尔德（Dullard）透露，尽管他通过BMP配体抑制了SMADL/5/8的磷酸化，但他没有通过恒定的活性BMP I型受体抑制Smadl/5/8的磷酸化。此外，据揭示了钝的人会降低BMP受体的丰度。此外，通过免疫沉淀分析了钝的和BMP受体之间的相互作用。结果表明，Dullard可以与BMP受体形成复合物。此外，纯化了磷蛋白，并揭示了Dullard还降低了BMP I型受体的磷酸化态。从这些原因来看，杜拉德是一种磷酸酶，可促进BMP受体的去磷酸化和降解，并被认为对BMP进行负调节。其中一些内容是在澳大利亚国际发展生物学学会上提出的。此外，他目前正在撰写和提交论文。我们还分析了爪蟾中的脑肾上腺素发生，并分析了形成后源性的因素。