イヌDectin-2プロモーターによる新しい抗腫瘍DNAワクチン開発の基礎研究

利用犬Dectin-2启动子开发新型抗肿瘤DNA疫苗的基础研究

• 批准号: 14760206
• 负责人: 盆子原 誠
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Nippon Veterinary and Life Science University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14760206/
• 关键词: 樹状細胞; プロモーター; 転写活性

ランゲルハンス細胞(LC)は表皮に存在する樹状細胞(DC)の一つで、極めて強い抗原提示能を有する。すぐれた免疫学的特性を持つにもかかわらず、LCを標的とした蛋白発現システムは今まで開発されなかったが、これはLC選択的な遺伝子発現を可能にする転写調節ユニットが同定されなかった事による。昨年、我々はLC関連分子、Dectin-2遺伝子の転写調節領域(Dec2FR)とLuc遺伝子を組み込んだトランスジェニックマウス(Dec2FR-Lucマウス)を用いて、Dec2FRの下流に組み込まれた遺伝子はLC選択的に発現できることを報告した。今年、このマウスを用いてDec2FRのLC選択性をさらに検討し、その転写活性の調節を解析した。Dec2FR-LucマウスよりLC、DC、マクロファージ、T細胞およびB細胞を分離し、これらの細胞をLPSあるいはConAで刺激しLuc活性を測定した。非刺激下のLuc活性はLCで高値を示し、他の細胞ではほとんど認められなかったが、刺激下ではLCのLuc活性に変化は認められず、DC、マクロファージ、T cellおよびB cellで様々な程度の活性増加が認められた。しかしながら、刺激下においてもLCのLuc活性は他の細胞に比べて高値を示し、活性化された条件下においてもDec2FRのLC選択性が認められた。また、Dec2FRにはAP-1結合領域、IFN-γ-responsible elementなどを含むシス調節領域が認められたが、LCにおけるDec2FRの転写活性はPMAやIFNγによっても増強されなかった。一方、Dec2FR-LucマウスへのUVB照射によりLCのDec2FR転写活性は著しく増加した。Dec2FRには活性化された条件下においてもLC選択性が認められ、さらにUVBによりその活性を増加できることから、LCを標的とした遺伝子/蛋白発現システムの構築に利用できるプロモーターであると考えられた。

The presence of dendritic cells (DC) in the epidermis and the presence of dendritic cells in the epidermis are extremely strong and the antigen prompts can be detected. The immunological properties of すぐれたをhold the つにもかかわらず, LC をlabeled としたprotein発appearsシステムは日まで开発されなかったが, これはLC selected な伝子発 appear を may にする転write adjustment ユニットが同定されなかった事による. Last year, I worked on the LC-related molecule, Dectin-2 Legacy Regulatory Field (Dec2FR) and the Luc Legacy Biotechnology Group.マウス(Dec2FR-Lucマウス)を用いて、Dec2FRの性に组み込まれた伝子はLC选択’s に発appears できることをreport した. This year, このマウスを uses いてDec2FRのLC to select 択性をさらに検検し, and その転WRits active adjustment and analysis した. Dec2FR-Luc Materia LC, DC, Materia Medica, T cells and B cells The cells were separated and the LPS was used to stimulate ConA and the Luc activity was measured. The Luc activity under non-stimulation is high and the LC value is high, and other cells are recognized and recognized.たが, ではLCのLuc activity under stimulation, に剉は recognized められず, DC, マクロファージ, T CellおよびB cellで様々なThe degree of activity increasesがcognizeめられた.しかしながら、Under stimulation, LCのLuc activity is higher than べて. Shown is that under the conditions of activation and activation, the LC of Dec2FR is selected.また, Dec2FR にはAP-1 binding domain, IFN-γ-responsible elementなどを contains the むシス adjustment field がcognize められたが, LC におけるDec2FR の転WRITE active はPMA やIFNγ によっても嗗强されなかった. One side, Dec2FR-Luc マウスへのUVB irradiation LCのDec2FR転activation は しく Increase plus した. Dec2FR is activated under the conditions of LC selection, UVB activation and improvement.ることから, LCを名とした伝子/protein発见システムのstructuringにutilizationできるプロモーターであると考えられた.