Charakterisierung des ADP-ribosylierenden Bacillus sphaericus Toxins MTX

ADP-核糖基化球形芽孢杆菌毒素 MTX 的表征

• 批准号: 5336938
• 负责人: Professor Dr. Klaus Aktories
• 金额: --
• 依托单位: Abteilung I
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2000-12-31 至 2003-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/5336938?language=en
• 关键词: Charakterisierung; des; ADP; ribosylierenden; Bacillus

Bacillus sphaericus produziert ein 97 kDA ADP-ribosylierendes Toxin (MTX), das moskitozidale Eigenschaften hat. Das Toxin ist von besonderem pharmakologischem und toxikologischem Interesse, weil es sowohl in Insekten- als auch in Säugetierzellen zytotoxische und zytopathische Eigenschaften hat. Das Toxin wird proteolytisch aktiviert, wobei ein N-terminales ~27 kDA und ein C-terminales ~70 kDA Fragment entstehen. Das 27 kDa Fragment besitzt ADP-Ribosyltransferase-Aktivität und modifiziert in vitro zahlreiche Proteine im Zytosol von Insekten- und Säugetierzellen. Das 70 kDA Fragment ist wahrscheinlich für die Zellbindung und die Aufnahme des Toxins in die Zelle verantwortlich. In dem vorliegenden Antrag soll die Enzymaktivität des Toxins biochemisch charakterisiert und die eukaryonten Zielsubstrate der bakteriellen ADP-Ribosyltransferase identifiziert werden. Es wird ein Fusionstoxin konstruiert, das aus der katalytischen Domäne der ADP-Ribosyltransferase von B. sphaericus und dem Zelltransportsystem von Clostridium botulinum C2 Toxin besteht. Mit Hilfe des Zelltransportsystems sollen die zytotoxischen und zellulären Wirkungen von MTX in verschiedenen Zelltypen (Insektenzellen und Säugetierzellen) untersucht werden. Schließlich soll die Interaktion der 27 kDA Enzymdomäne des B. sphaericus Toxins mit der putativen 70 kDa Bindungs- und Transportdomäne, die zu einer Inhibiton der Enzymaktivität führt, charakterisiert werden.

球形芽孢杆菌（Bacillus sphaericus）产生97 kDA ADP-核糖基化毒素（MTX），这是蚊子的特征。毒素是药理学和药理学的重要组成部分，因为它在生理学中也有重要作用，也包括Säugetierzellen zytotoxische und zytopathische Eigenschaften hat。该毒素具有蛋白水解活性，其中一个N-末端~27 kDA和一个C-末端~70 kDA片段被发现。Das 27 kDa Fragment besitzt ADP-Ribosyltransferase-Aktivität und modifiziert in vitro zahlreiche Proteine im Zytosol von Insekten- und Säugetierzellen. 70 kDA的片段对细菌的结合和细菌中毒素的释放有很大的帮助。在此之前，Antrag将通过毒素的生化特性和ADP-核糖基转移酶的真核底物的鉴定来确定。这将是一种融合蛋白结构，来自B的ADP-核糖基转移酶的催化结构域。sphaericus和肉毒梭菌C2毒素的Zell转运系统。Mit Hilfe des Zelltransportsystems sollen die zytotoxischen und zellulären Wirkungen von MTX in vertenen Zelltypen（Insektenzellen und Säugetierzellen）untersucht韦尔登. Schließlich soll die Interaktion der 27 kDA Enzymdomäne des B.具有70 kDa结合和转运域的球形芽孢杆菌毒素，具有韦尔登的酶活性抑制作用。