权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

トランスジェニックメダカを用いた脊椎形成突然変異体のスクリーニングとその解析

利用转基因青鳉筛选脊柱形成突变体及其分析

基本信息

批准号：
15770142
负责人：
猪早敬二
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tokyo Institute of Technology
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15770142/
关键词：
メダカトランスジェニック脊椎突然変異硬節突然変異体

项目摘要

申請者らが開発に成功した、twist遺伝子のプロモーターを用いたGFPトランスジェニックメダカ系統では、生きたまま硬節の挙動を観察することが可能である。twist-GFP陽性細胞は胚発生の過程で、予定椎間板領域の脊索周囲に局在するようになり、その局在は成魚の椎間板の周囲においても継続して観察される。透過型電子顕微鏡を用いて超微細構造学的な解析を行ったところ、twist-GFP陽性細胞は立方体もしくは楕円形で、いずれも粗面小胞体に富んでおり、哺乳類における典型的な骨芽細胞の特徴と一致した。これらの結果は、twist-GFP陽性細胞が椎体形成を担う骨芽細胞であり、椎間板領域が椎体形成の場として機能的であることを示唆している。また、脊椎融合の表現型を示す自然発生突然変異体であるダルマメダカとトランスジェニック系統との交配により、twist-GFPトランスジェニック"ダルマ"メダカを作製したところ、椎体同士の融合が認められる予定椎間板領域において、twist-GFPの発現が欠失していることが明らかとなった。この結果は、硬節細胞の椎間板形成への関与を支持するものであり、twist-GFPトランスジェニック系統を用いて、硬節および脊椎に異常を示す突然変異体の単離を行う本実験方法が有効であることを示した。さらに、化学変異剤ENU(N-エチル-N-ニトロソ尿素)を用いて突然変異を誘発し、脊椎形成に関わる突然変異体の単離を行った。その結果、脊椎の分節性が左右でズレが生じる変異体が2系統、脊椎融合を示す変異体を3系統、単離することに成功した。

The applicant is successful and the twist is successful, and the twist is that GFP is usedスジェニックメダカ system では, raw きたままhard section の挙动を観看することがpossible である. Twist-GFP positive cells are involved in the process of embryogenesis and are localized around the notochord in the predetermined intervertebral plate area.するようになり, そのbureau in は成鱼の intervertebral plate のweek囲においても継続して観看される. Transmission electron microscopy, analysis of ultra-fine structures using ultrafine structures, cubes of twist-GFP positive cells The characteristics of the typical bone bud cells of mammals are the しくは楕円shaped で, いずれもrough small cell body に富んでおり, and mammalian における. The result of the test, the twist-GFP positive cells, the vertebral body formation, the bone bud cells, the intervertebral body formation field, the function of the intervertebral body, the function of the vertebral body.また、The manifestation of spinal fusion is a manifestation of a natural disease and a sudden change in the body.ンスジェニックSystemとのMATINGにより、twist-GFP トランスジェニック"ダルマ"メダカを Manufacturer したところ、vertebral body doshi fusion がcognition められる predetermined intervertebral plate collar Domain において, twist-GFP の発appears owed loss していることが明らかとなった.このRESULTS は、Scleroderm cells のlamina formation へのrelated and をsupport するものであり、twist-GFP トランスジェニックThe system is used, the hard joint is abnormal, the spine is abnormal, and the abnormal body is suddenly changed. The original method is effective and effective.さらに, chemical エチル-N-ニトロソurea) をいて sudden 変different をinducing発し, spine formation に关わる suddenly 剉different body の単里を行った.その results, spinal segmentation でズレが生じる変 allogeneic が2 system, spinal fusion をshow allobody 3 system, single separation することにsuccessful した.