細菌由来物質がマウス小腸上皮細胞の抗原提示機能に及ぼす影響の解析

细菌来源物质对小鼠小肠上皮细胞抗原提呈功能的影响分析

• 批准号: 15780094
• 负责人: 山田 潔
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15780094/
• 关键词: 小腸上皮細胞; 初代培養細胞; 細胞株; 抗原提示; 腸管免疫; リポ多糖; ペプチドグリカン; T細胞; 細菌由来物質; 炎症性サイトカイン; ケモカイン; Toll様レセプター; サイトカイン

本研究では、小腸上皮細胞(IEC)による抗原特異的なT細胞の増殖応答の誘導および抑制について解析を行った。IECとしてマウス由来初代培養IECあるいは初代培養IECから樹立した細胞株を用いた。樹立したマウスIEC細胞株におけるMHCクラスII分子、CD80、CD86の恒常的な発現はほとんど認められなかった。一方、IFN-γ存在下で培養することによって、MHCクラスII分子の発現が強く認められたが、CD80、CD86の発現に顕著な変化は認められなかった。微生物由来物質であるリポ多糖(LPS)、ペプチドグリカン(PGN)による刺激によっても、これらの分子の発現に顕著な変化は認められなかった。卵白アルブミン(OVA)特異的なT細胞抗原レセプター遺伝子をもつトランスジェニックマウスの脾臓、腸間膜リンパ節由来T細胞の抗原特異的な増殖応答は、IFN-γ存在下で前培養したIEC細胞株によってのみ認められた。一方、粘膜固有層由来T細胞に対して、IFN-γ処理の有無に関わらずIEC細胞株は抗原特異的増殖応答を誘導した。小腸上皮内リンパ球から分離したCD4陽性T細胞に対しては、IEC細胞株あるいは脾臓細胞を抗原提示細胞とした場合のいずれにおいても、抗原特異的増殖応答は誘導されなかった。脾臓由来CD4陽性T細胞をIFN-γ処理IEC細胞株とOVAタンパクの共存下で培養した場合には、増殖応答の誘導は認められなかった。初代培養IECの培養上清の添加によって認められるT細胞の増殖抑制効果について、液性因子の同定を試みた結果、加熱耐性の低分子であることが示された。また、上清中にはプロスタグランジンE2(PGE2)が検出された。PGE2合成阻害剤であるインドメタシン存在下で培養した結果、IEC培養上清中のT細胞増殖に対する抑制効果が消失したことから、PGE2が主要な液性抑制因子であることが示唆された。

This study was conducted to analyze the induction and inhibition of proliferation response of antigen-specific T cells in intestinal epithelial cells (IEC). IECs are derived from primary culture IECs are derived from primary culture IECs To establish a stable expression of MHC II molecules, CD80 and CD86 in IEC cell lines In the presence of IFN-γ, the expression of CD80, CD86 and MHC II molecules was strongly recognized. Microbially derived substances such as polysaccharides (LPS), polysaccharides (PGN), etc. are stimulated by the presence of these molecules. OVA-specific T cell antigen is expressed in the spleen and intestinal membrane, and is derived from T cell antigen-specific proliferation responses. IEC cell lines are pre-cultured in the presence of IFN-γ. In addition, the presence or absence of IFN-γ treatment was associated with the induction of antigen-specific proliferation in IEC cell lines derived from T cells in the lamina propria. CD4 positive T cells isolated from small intestine epithelial cells were induced by antigen-specific T cells isolated from spleen cells of IEC cell lines. CD4-positive T cells from spleen were induced by IFN-γ in culture. The growth inhibition effect of T cells, the isostatic test results of liquid factors, and the low molecular weight of heat tolerance were shown in the supernatant of primary culture IEC. E2(PGE2) is the most important part of E2(PGE2). PGE2 synthesis inhibition factor in the presence of culture results, IEC culture supernatant T cell proliferation inhibition effect disappeared, PGE2 as a major liquid inhibitor.

项目成果

特異抗原経口投与時における小腸上皮内リンパ球の遺伝子発現変化

口服特定抗原后小肠上皮内淋巴细胞基因表达的变化

• 发表时间: 2005
• 期刊: 臨床免疫 43・2
• 作者: 戸塚 護;山田 潔
• 通讯作者: 山田 潔