原代培养胃肠道上皮细胞永生化技术的开发-猫眼课题宝

原代培养胃肠道上皮细胞永生化技术的开发

批准号：

17659213

负责人：

藤田潤

金额：

$1.92万

依托单位：

Kyoto University

依托单位国家：

日本

项目类别：

Grant-in-Aid for Exploratory Research

财政年份：

2005

资助国家：

日本

项目状态：

已结题

起止时间：

2005 至 2006

来源：

https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17659213/

关键词：

ガンキリン細胞不死化がん抑制遺伝子細胞培養テロメアーゼ p53 Rb 不死化テロメラーゼレトロウイルス

项目摘要

项目成果

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ヒトテロメラーゼ逆転写酵素のサブユニット(hTERT)の過剰発現により不死化された初代培養細胞では、腫瘍抑制蛋白Rbとp53両者の機能欠損か、細胞周期の負の制御分子p16INK4Aとp53両者の機能欠損が生じている。一方、Gankyrinは、Rb、p53、p16INK4A全ての機能を抑制する。そこで、hTERTとGankyrinとを過剰発現させることにより容易に初代培養細胞を不死化することができないかどうか検討した。1.hTERTとGankyrinとの過剰発現による初代培養細胞の不死化平成17年度に作成したhTERTとGankyrinの両方を発現するレトロウイル(pSF/hTERT-Gankyrin)をマウス及びヒト腹膜中皮の初代培養細胞に感染させ、G418を含む培養液で継代することにより、不死化した細胞株を得ることができた。この不死化した培養細胞では確かにhTERTとGankyrin遺伝子が過剰発現していた。2.hTERTとGankyrinとを過剰発現するトランスジェニックマウスの作成まずHBV由来のプロモーターで肝細胞特異的にガンキリンを過剰発現するトランスジェニックマウスの作成を試みたが、発現レベルの高いものが得られなかった。そこで別のプロモーターでガンキリントランスジェニックマウスを作成し、ガンキリン高発現の肝細胞を初代培養した。現在継代中である。今後さらに、このガンキリントランスジェニックマウスとhTERTトランスジェニックマウスとを掛け合わせて検討を行いたい。

期刊论文(11)

专著(0)

科研奖励(0)

会议论文

The oncoprotein gankyrin negatively regulates both p53 and RB by enhancing proteasomal degradation

DOI： 10.4161/cc.4.10.2107

发表时间： 2005-10-01

期刊：

CELL CYCLE

影响因子： 4.3

作者：

[Higashitsuji, H, Liu, Y, Fujita, J]

通讯作者： Fujita, J

In vivo selection of transduced hematopoietic stem cells and little evidence of their conversion into hepatocytes

转导造血干细胞的体内选择及其转化为肝细胞的证据很少

DOI： --

发表时间： 2006

期刊：

J Hepatol 45

影响因子： --

作者：

[Valcourt U, Kowanetz M, Niimi H, Heldin CH, Moustakas A, 北島勲, 北島勲, Higashitsuji H, Dawson S, Mayer RJ, Yamaguchi K]

通讯作者： Yamaguchi K

Enhanced deacetylation of p53 by the anti-apoptotic protein HSCO in association with HDAC1.

与 HDAC1 相关的抗凋亡蛋白 HSCO 增强了 p53 的脱乙酰作用。

DOI： --

发表时间： 2007

期刊：

J Biol Chem (印刷中)

影响因子： --

作者：

[Valcourt U, Kowanetz M, Niimi H, Heldin CH, Moustakas A, 北島勲, 北島勲, Higashitsuji H]

通讯作者： Higashitsuji H

Cirp protects against tumor necrosis factor-□-induced apoptosis via activation of extracellular signal-regulated kinase.

Cirp 通过激活细胞外信号调节激酶来防止肿瘤坏死因子-□ 诱导的细胞凋亡。

DOI： --

发表时间： 2005

期刊：

BBA-Mol Cell Res (印刷中)

影响因子： --

作者：

[Valcourt U, Kowanetz M, Niimi H, Heldin CH, Moustakas A, 北島勲, 北島勲, Higashitsuji H, Dawson S, Mayer RJ, Yamaguchi K, Sakurai T, Higashitsuji H, Higashitsuji H, Watanabe H, Sakurai T, Sakurai T]

通讯作者： Sakurai T

A novel protein Depp, which is induced by progesterone in human endometrial stromal cells activates Elk-1 transcription factor

DOI： 10.1093/molehr/gah186

发表时间： 2005-07-01

期刊：

MOLECULAR HUMAN REPRODUCTION

影响因子： 4

作者：

[Watanabe, H, Nonoguchi, K, Fujita, J]

通讯作者： Fujita, J