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ヒト神経系におけるガングリオシド分布様式

神经节苷脂在人体神经系统中的分布模式

基本信息

批准号：
15790456
负责人：
小鷹昌明
金额：
$ 2.18万
依托单位：
Dokkyo Medical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2003
资助国家：
日本
起止时间：
2003 至 2004
项目状态：
已结题

项目摘要

ウシ脳ガングリオシド,各種合成ガングリオシド,Campylobacter jejuniリポオリゴ糖感作によるモノクローナル抗ガングリオシド抗体作成を試みた.アジュバンドを加え調整したウシ脳ガングリオシドや各種合成ガングリオシド,Guillain-Barre症候群患者から分離されたC.jejuniリポオリゴ糖を,1週間毎にGD3合成酵素ノックアウトマウスあるいは,GM2/GD2合成酵素ノックアウトマウスに繰り返し感作した.経時的に採血し,ELISAを用いて抗ガングリオシド抗体を測定し,抗体の上昇が極期に達した時点で,マウスの脾臓を摘出した.ポリエチレングリコール法を用いて脾細胞とミエローマ細胞との融合細胞を作成し,細胞を培養した.IgG抗GM1抗体を始めとするIgG抗GQ1b抗体,IgG抗GD1b抗体など,38種類の各種モノクローナル抗ガングリオシド抗体産生クローンを樹立した.得られたクローンを培養し十分量のモノクローナル抗体を得た.得られた免疫グロブリン可変部領域のアミノ酸配列をジデオキシ法でシークエンシングし,抗体特性を検討した.神経組織における各種ガングリオシドの発現パターンを検討し,組織,細胞レベルでの局在を明らかにするために,免疫組織化学的に一連のモノクローナル抗ガングリオシド抗体を反応させた.ラットの小脳脊髄神経,末梢神経を摘出し,固定後神経組織の薄層切片を作成し,モノクローナル抗GD1b抗体を用いてラット後根神経節にGD1bが局在することを確認し,固有感覚に関与するパルブアルブミンと共に局在することを明らかにした.その成果について、平成16年9月の国際神経免疫学会で口演した.さらに,筆頭著者としてJournal of Neuroimmunology投稿へ向けて準備中であり,ほぼ完成した.

It is a kind of synthetic drug, and it can be used to make anti-drug antibody. In Guillain-Barre syndrome patients, C.jejuni was isolated from glucose, and GD3 synthase was detected in one week. GM2/GD2 synthase was detected in one week. When the blood is collected,ELISA is used to detect the antibody, and the antibody rises to the peak. IgG anti-GQ1b antibody,IgG anti-GD1b antibody, 38 kinds of anti-GQ1b antibody production and development. A very high amount of antibody was obtained. To obtain the immune response, the antibody can be divided into different regions, and the antibody characteristics can be discussed. In the study of the development of various types of neurotissue, tissue, cellular tissue and tissue, immunohistochemistry was used to detect the development of anti-neurotissue antibodies. The thin layer sections of brain tissue after fixation were prepared, and the anti-GD 1b antibody was used to confirm the presence of GD1b in the root nerve segment after fixation. The International Society for Neuroimmunology was held in September 2016. Today, the author of the Journal of Neuroimmunology contributed to the preparation of the journal, completed.