新規動物モデルを用いた造血器腫瘍に対する細胞免疫療法の抗腫瘍効果及び安全性の確立

使用新的动物模型建立造血肿瘤细胞免疫疗法的抗肿瘤功效和安全性

• 批准号: 15790492
• 负责人: 内田 直之
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 2004
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15790492/
• 关键词: NOD; scid; 造血幹細胞; 異種間移植; 癌免疫療法; 細胞傷害性T細胞; side population; nude NOD

1.マウス造血細胞中side population細胞を用いたマウス移植系確立の基礎検討:マウス造血細胞をHoechst33342色素(Ho)で染色しside population形質をもつ細胞群ともたない細胞群で造血幹細胞の分布を検討した(Canada国Vancouver、British Columbia癌研究所のEaves教授との共同研究)。これによってマウスを用いた実験系の基本的手技と解析方法を体得した。2.ヒト白血病細胞キメラマウスの作成:NOD/scidマウスに4.5GyのX線照射後にHLA-A24陽性のヒト白血病細胞株MEG01、KAZZ、KCL22、陰性のIIL60、NB4をそれぞれ1x10^7個静注した。4週以降骨髄吸引細胞中にIIL60のみが検出でき、他の細胞株は骨髄に定着しなかった。以上より本モデルにおいて細胞株としてHL60が最適と考えられた。ヒト急性骨髄性白血病患者末梢血細胞・骨髄細胞を同様にX線照射したマウスに静注したところ、サンプル1は4週後に5匹すべてにヒト細胞の生着を認めた(マウス骨髄細胞中の2〜12%)。サンプル2は9匹中5匹(同2〜19%)にヒト細胞が生着した。以上から、ヒト白血病細胞、白血病細胞株が生着したキメラマウスを再現性高い状態で作成する系を構築できた。3.ヒト白血病細胞キメラマウスに対する細胞免疫療法:上記2で作成したHL60細胞を静注したキメラマウスに3〜4週後にヒト臍帯血細胞を4.5Gy放射線照射後に静注した。その7週後に骨髄吸引細胞中のヒト細胞のキメリズムを検討したところ、生存していた3匹全員に高いヒト細胞の生着を認めた(60〜89%)。生着したヒトCD45陽性細胞の90%以上はHLA-A24陽性の臍帯血細胞であった。以上から本モデルがin vivoでの細胞免疫療法を検討するに十分なものであると考えられた。

1. The side population cells in the hematopoietic cells were established with the transplantation line of the hematopoietic cells. The hematopoietic cells were stained with Hoechst33342 pigment (Ho). The hematopoietic cells were stained in the shape of side population. The distribution of hematopoietic cells in the hematopoietic cells was studied jointly by Professor Eaves of the Vancouver and British Columbia Cancer Research Institute. I don't know how to use the basic hand skills to analyze the body. two。 The leukemic cell lines MEG01, KAZZ, KCL22, IIL60 and NB4 were injected intravenously with NOD/scid, KAZZ, KCL22, NB4, 1x10 ^ after irradiation. 4. In order to attract IIL60 in the cell, the bone of the cell line was fixed by bone. This is the most important part of this study. The cell line HL60 is the most important. The peripheral blood cells of patients with acute osteoblastic leukemia were injected intravenously with X-ray irradiation. After 1-4 years of treatment, 5 peripheral blood cells of patients with acute osteoblastic leukemia were infected with recognition (2

项目成果

Uchidai N, Dykstra B, Lyons K, Leung- F, Kristiansen M, Eaves C.: "ABC transporter activities of murine hematopoietic stem cells vary according to their developmental and activation status."Blood. In press. (2004)

Uchidai N、Dykstra B、Lyons K、Leung-F、Kristiansen M、Eaves C.：“小鼠造血干细胞的 ABC 转运蛋白活性根据其发育和激活状态而变化。”血液。

Uchida N, Dykstra B, Lyons KJ, Leung YKF, Eaves C.: "Different in vivo repopulating activities of purified hematopoietic stem cells before and after being stimulated to divide in vitro with the same kinetics."Experimental Hematology. 31. 1338 (2003)

Uchida N、Dykstra B、Lyons KJ、Leung YKF、Eaves C.：“纯化的造血干细胞在体外以相同的动力学刺激分裂之前和之后的体内重新增殖活性不同。”实验血液学。

Maeda M, Uchida N, Eaves CJ, Takei F.: "Slow receptor acquisition by NK cells regenerated in vivo from transplanted fetal liver or adult bone marrow stem cells."Experimental Hematology. 31. 1015 (2003)

Maeda M、Uchida N、Eaves CJ、Takei F.：“从移植的胎儿肝脏或成人骨髓干细胞体内再生的 NK 细胞缓慢获得受体。”实验血液学。