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角膜潰瘍の発生機序と薬品の開発

角膜溃疡发生机制及药物研发

基本信息

批准号：
04F04249
负责人：
西田輝夫
金额：
$ 1.54万
依托单位：
Yamaguchi University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

项目摘要

1 I型コラーゲンゲル内で三次元的に培養したウサギ角膜実質細胞に,IL-1およびNF-κB阻害剤であるsulfasalazineを添加して培養した。培養上清中のヒドロキシプロリンを定量することにより,コラーゲン分解活性を算出した。また,MMPsの発現はImmunoblot法およびreal time PCR法により解析した。IL-1により有意に亢進した角膜実質細胞によるコラーゲンゲル分解は,sulfasalazineの添加によって濃度依存的に抑制された。sulfasalazineはMMPの産生および活性化を抑制することによって,角膜実質細胞によるコラーゲン分解を抑制することが明らかとなった。IL-1の作用機序として,角膜実質細胞のNF-κBの活性化が関与する。2 角膜実質細胞に,グラム陰性菌の膜成分であるlipopolysaccharide(LPS)およびステロイド剤や,トリプトライドを添加して培養した。角膜実質細胞から発現されるサイトカインやケモカインの濃度をELISA法およびマルチプレックス分析システムで測定した。real-time PCR法を用いてケモカインや接着分子のmRNAの発現を比較検討する。グラム陰性菌の膜成分であるlipopolysaccharide(LPS)により有意に亢進した角膜実質細胞から発現されるIL-6,G-CSF, MCP-1,IL-8およびICAM-1は,トリプトライドおよびデキサメサゾンの添加によって濃度依存的に抑制された。その作用機序として,角膜実質細胞のNF-κB活性を抑制し,サイトカイン、ケモカインおよび接着分子の発現を抑制することが示された。

1. Type I corneal cells were cultured three-dimensionally in the cornea, and IL-1 was used to inhibit NF-κB and the cells were cultured with sulfasalazine. In the culture supernatant, the decomposition activity of the decontamination and decomposition of the decomposition activity of the decontamination and decomposition of the decontamination was calculated.また,MMPsの発appearsはImmunoblot methodおよびreal time PCR methodによりanalyticsした. IL-1 has been shown to inhibit the decomposition of IL-1 in corneal epithelial cells in a concentration-dependent manner by adding sulfasalazine. Sulfasalazine is used to inhibit the production and activation of MMP and to inhibit it.って, によるコラーゲン decomposition of corneal stromal cells することが明らかとなった. The mechanism of action of IL-1 is related to the activation of NF-κB in corneal stromal cells. 2 Corneal cytoplasm cells, lipopolysaccharide (LPS), a membrane component of lipopolysaccharide-negative bacteria, and cultured with トリプトライドを added. Corneal cytoplasmic cell concentration ELISA method is used to measure the quality of the test. The real-time PCR method is based on the comparison of molecular expression of mRNA and protein. The membrane component of グラムnegative bacteria, lipopolysaccharide (LPS), is intended to be hyperactive, and the corneal stromal cells are present, IL-6, G-CSF, MCP-1, IL-8 およびICAM-1は, トリプトライドおよびデキサメサゾンのadded によって concentration-dependent に inhibitory された.そのMechanism of actionとして, NF-κB activity of corneal stromal cells is inhibited, サイトカイン、ケモカインおよびThen the molecular の発appears and suppresses the することがshows された.