高度利用を目指した淡水魚魚類ミオシンのタンパク質工学的研究

淡水鱼肌球蛋白高级利用的蛋白质工程研究

基本信息

批准号：
04J03804
负责人：
福島英登
金额：
$ 2.18万
依托单位：
The University of Tokyo (2005-2006)Fisheries Research Agency (2004)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2006
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究は、未だ充分に高度利用されていない淡水魚を対象に、様々な飼育条件下における筋肉タンパク質の性状変化を分子レベルで調べた上で、魚肉加工品素材としての機能性を明らかにし、高度利用の基礎とすることを目的とした。始めに、種々の成長段階および異なる温度で飼育したハクレンを対象にミオシン重鎖遺伝子(MYH)の発現変動を調べた。ハクレン成魚(体重4.9kg、採取時水温23.4℃)の普通筋および血合筋、10℃、18℃および26℃に馴化したハクレン幼魚(体重10-20g)の普通筋から調製したfirst strand cDNAを鋳型に、3'末端の翻訳領域および非翻訳領域を含む約450bpの領域をPCR増幅し、5種類のMYHを得た。分子系統解析の結果、5種類のMYH中、1つは胚体型、4つは成体速筋型と判断され、胚体型MYHは既報のソウギョ成体速筋10℃型MYHと最も高い相同性を示した。また、4つの成体速筋型MYH中、2つはソウギョ中間温度および30℃型と最も高い相同性を示し、残る2つは既報のrock codの遅筋で主に発現するA4型MYHと高い相同性を示した。分子系統解析から判断する限り、ソウギョおよびハクレンでは既報のコイ速筋10℃型よりむしろ胚体型MYHに類似した。この結果は、2倍体のソウギョおよびハクレンは同じコイ科でも4倍体のコイとは馴化機構がやや異なることを示唆するもので、魚類MYHの進化を考える上で興味深い。既報のように、冬季ソウギョのミオシンは高い加熱ゲル形成能を示す。また、シログチおよびスケトウダラの普通筋ミオシンも高いゲル形成能を示す上、これらMYHも胚体型に属することから、魚類胚体型MYHは加熱ゲル形成に重要なアミノ酸置換が起こっている可能性が示唆された。

这项研究旨在调查分子水平各种育种条件下肌肉蛋白质的变化，靶向尚未充分利用的淡水鱼，并阐明加工鱼类产品的功能，并作为先进使用的基础。首先，在生长的各个阶段和肉桂的不同温度下研究了肌球蛋白重链基因（MYH）的表达变化。由成年糖的正常肌肉和血液社会肌肉制备的第一链cDNA（重量为4.9 kg，水温23.4°C时，收集时的水温为23.4°C）和糖糖糖糖糖糖糖糖糖（10-20 g）的普通肌肉在10、18和26°C，含有450 bp的区域，含有450 bp的区域。放大以获得五种不同的MYH类型。分子系统发育分析表明，在五种类型的MYH中，一种是胚胎类型，而四种是成年的快速肌肉类型，而胚胎类型的MYH对先前报道的Sowgyo成年成年肌肉10°C MYH的同源性最高。此外，在四个成年快速交换MYHS中，有两个与Sougyo和30°C类型的中等温度显示出最高的同源性，而其余的两个与A4 MyH表现出很高的同源性，这主要以慢速岩石COD的慢速肌肉表示。从分子系统发育分析来看，生殖器MYH与以前报道的锦鲤快速肌肉类型相似。该结果表明，二倍体糖浆和糖浆的习惯机制与四倍体鲤鱼的习惯机制略有不同。如前所述，冬季糖浆中的肌球蛋白具有较高的加热凝胶形成能力。此外，百合霉和角膜藻的普通肌肉肌球蛋白也具有较高的凝胶形成能力，并且由于这些MYH也属于胚胎形式，因此表明Fish Embryonic形式的MYH可能具有对加热凝胶形成的氨基酸取代。