若年性ミオクローヌスてんかん新規原因遺伝子の機能解析

青少年肌阵挛性癫痫新致病基因的功能分析

• 批准号: 16790501
• 负责人: 鈴木 俊光
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16790501/
• 关键词: 若年性ミオクローヌスてんかん; 特発性てんかん; 6p12; EFHC1; カルシウムチャネル; Cav2.3; 相互作用; 抗体アレイ

若年性ミオクローヌスてんかん(JME)は、思春期(8〜20歳)に発症し、ミオクロニー発作、強直間代発作などを特徴とする最も頻度の高い特発性てんかんの一つである。原因となる遺伝子は、複数あることが予想されている。我々は、候補領域の一つである第6番染色体短腕領域6p12から新規の原因遺伝子EFHC1の同定に成功した。メキシコのJME6家系から、それぞれの家系内で連鎖を示す5種類のミスセンス変異を発見している(Suzuki et al. Nat.Genet. 36,842-849)。さらに、この遺伝子のコードするタンパクが、カルシウムチャネル(Cav2.3)を活性化することを、電気生理学的手法を用いることで(インビトロの系において)、突き止めているが、その作用機序は解明されていない。有効な治療法の開発のためには、疾患成立機序を解明する事が必要である。昨年度までに、EFHC1とカルシウムチャネル(Cav2.3)間の分子的な相互作用の検出を計画し、抗体アレイを用いEFHC1と相互作用するタンパクを検索し、複数の候補タンパクを得る事が出来た。また、さらなる候補蛋白を得るために、EFHC1をベイトとし、フラグメントライブラリーを使ったYeast Two Hybrid Screening法を行ない、EFHC1と相互作用するタンパクを検索した。その結果、新たな候補タンパクを得る事が出来た。得られた複数の候補タンパクおよびEFHC1の哺乳動物細胞用の発現コンストラクトの作成を行い、これらの作成したコンストラクトを用い共免疫沈降法によりタンパク間の相互作用を再確認した。現在、これらの研究成果を発表する為の準備中である。

If in sexual ミ オ ク ロ ー ヌ ス て ん か ん (JME) は, pubescent (8 ~ 20) showed に 発 disease し, ミ オ ク ロ ニ ー 発 works, stiffness between 発 な ど を, 徴 と す る も most high frequency の い te 発 て ん か ん の a つ で あ る. The reason is that となる leaves the 伝 sub-伝, and the plural ある ある とが とが gives the されて る る. I 々 々, in the candidate field <s:1> one である, in the short wrist field of chromosome 6, 6p12 ら ら, in the new regulation <e:1>, the 伝 offspring EFHC1 is determined to be に successful た. メ キ シ コ の JME6 family か ら, そ れ ぞ れ の family chain を で す indicated within 5 kinds の ミ ス セ ン ス - different を 発 see し て い る (Suzuki et al. Nat. Genet. 36842-849). さ ら に, こ の posthumous son 伝 の コ ー ド す る タ ン パ ク が, カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル (Cav2.3) を activeness す る こ と を, electric 気 physiology gimmick を い る こ と で (イ ン ビ ト ロ の is に お い て), tu き check め て い る が, そ の function machine sequence は interpret さ れ て い な い. Effective な treatment methods <e:1> development ために ために, disease formation sequence を explanation する matters が necessity である. Yesterday's annual ま で に, EFHC1 と カ ル シ ウ ム チ ャ ネ ル な の molecules interaction between (Cav2.3) の 検 ア を plan し, antibodies レ イ を with い EFHC1 と interaction す る タ ン パ ク を 検 し and plural の alternate タ ン パ ク を た が る things out. ま た, さ ら な る alternate protein を have る た め に, EFHC1 を ベ イ ト と し, フ ラ グ メ ン ト ラ イ ブ ラ リ ー を make っ た Yeast Two Hybrid Screening method line を な い, EFHC1 と interaction す る タ ン パ ク を 検 cable し た. Youdaoplaceholder0 そ results, new たな candidates タ タ パ を を る things が come out た. Have ら れ た plural の alternate タ ン パ ク お よ び EFHC1 の mammalian cells with の 発 now コ ン ス ト ラ ク ト の を い, consummate こ れ ら の made し た コ ン ス ト ラ ク ト を い were immune to sink method に よ り タ ン パ の interaction between ク を reconfirm し た. Now, the research results of れら れら を have been released and する are in preparation for である.