若年性ミオクローヌスてんかん新規原因遺伝子の機能解析

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若年性ミオクローヌスてんかん(JME)は、思春期(8〜20歳)に発症し、ミオクロニー発作、強直間代発作などを特徴とする最も頻度の高い特発性てんかんの一つである。原因となる遺伝子は、複数あることが予想されている。我々は、候補領域の一つである第6番染色体短腕領域6p12から新規の原因遺伝子EFHC1の同定に成功した。メキシコのJME6家系から、それぞれの家系内で連鎖を示す5種類のミスセンス変異を発見している(Suzuki et al. Nat.Genet. 36,842-849)。さらに、この遺伝子のコードするタンパクが、カルシウムチャネル(Cav2.3)を活性化することを、電気生理学的手法を用いることで(インビトロの系において)、突き止めているが、その作用機序は解明されていない。有効な治療法の開発のためには、疾患成立機序を解明する事が必要である。昨年度までに、EFHC1とカルシウムチャネル(Cav2.3)間の分子的な相互作用の検出を計画し、抗体アレイを用いEFHC1と相互作用するタンパクを検索し、複数の候補タンパクを得る事が出来た。また、さらなる候補蛋白を得るために、EFHC1をベイトとし、フラグメントライブラリーを使ったYeast Two Hybrid Screening法を行ない、EFHC1と相互作用するタンパクを検索した。その結果、新たな候補タンパクを得る事が出来た。得られた複数の候補タンパクおよびEFHC1の哺乳動物細胞用の発現コンストラクトの作成を行い、これらの作成したコンストラクトを用い共免疫沈降法によりタンパク間の相互作用を再確認した。現在、これらの研究成果を発表する為の準備中である。