癌細胞の転移におけるSPARCの役割-特に臓器特異的転移との関連性について-

SPARC 在癌细胞转移中的作用 - 特别是其与器官特异性转移的关系 -

• 批准号: 16791148
• 负责人: 加藤 靖正
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kanagawa Dental College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-16791148/
• 关键词: SPARC; osteonectin; スプライシング; 癌転移; 転移; 臓器特異的転移; ノックアウトマウス

SPARCは,当初骨特異的蛋白質として見出された分子量43,000の糖タンパク質である.臨床検体を用いた解析から,多くの種類の癌組織において,SPARCの発現と病期や予後が相関することが報告されている.その一方で,SPARC遺伝子を強制発現させると癒細胞の増殖が抑制されるという報告や,アボトーシスを誘導するという報告など,相反する報告が多い.私達は,SPARCノックアウトマウスと同系のB16BL6メラノーマを用いて,癌細胞の転移へのSPARCの役割について検討した.B16BL6メラノーマにアンチセンスRNAを発現させることにより,SPARC発現をノックダウンさせた細胞を樹立した.肺への転移結節は,[SPARC KO mouse×antisense導入B16BL6]よりも[SPARC WT mouse×mock B16BL6]の方が,幼弱期(4〜5週齢)において高率であったが,成熟期(>8週齢)では,あまり差が得られなかった.このことは,SPARCの有無による肺転移能の違いは,宿主側に大きな要因があることを示している.ま,SPARCは血管内皮細胞などでも発現しているにもかかわらず,肺転移に関与するという結果は,SPARC自身の生理活性が反映された結果ではなく,SPARCがプロセッシングを受け,その断片が転移に関与する生理活性を示すことが考えられた.一方,私達は,高転移性Bl6-BL6メラノーマ細胞を酸性pHの培地で培養するとmatrix metalloproteinase-9(MMP-9)の発現が誘導されることを見出し,その細胞内情報伝達にはホスホリパーゼD,MAPキナーゼ,NFκBなどの関与を明らかにしてきた.また,酸性pHはMMP-9だけではなく他のプロテアーゼの合成を誘導していることを見出した.これらのことから,SPARCは酸性環境にてプロセッシングを受け,その断片が生理活性を示すとの仮説を立てるに至った.そこで,分泌されたSPARCのN末端とC末端にそれぞれFlagとMycのタグを結合させた融合蛋白質を発現するように発現ベクターを構築し,B16BL6細胞に導入した.細胞を酸性pHで培養することで,C末端側約8-kDaが断片化して遊離することが見出された.現在,この断片の切断部位,切断酵素について検討している.

SPARC, a bone-specific protein, has a molecular weight of 43,000. Clinical analysis, multiple types of cancer tissue, occurrence and prognosis of SPARC are reported. On the other hand, SPARC-induced gene expression was inhibited by stress, and cell proliferation was inhibited by stress. B16BL6 is a homologous strain of SPARC. It can be used to detect the expression of SPARC RNA in cancer cells. B16BL6 is a homologous strain of SPARC. The lung cancer has moved to nodules,[SPARC KO mouse×antisense B16BL6],[SPARC WT mouse× mouse B16BL6], and the young stage (4 ~ 5 weeks old) has a high rate, and the mature stage (>8 weeks old) has a high rate. The host side is the most important factor in SPARC-induced lung migration. The physiological activity of SPARC itself is reflected in the physiological activity of SPARC itself, which is reflected in the physiological activity of SPARC fragments. On the other hand, the expression of matrix metalloproteinase-9(MMP-9) in highly mobile B16-BL6 cells cultured at acidic pH was induced. It was found that the intracellular information was expressed in the cells. The acid pH of MMP-9 is higher than the pH of MMP-9. This is the first time that SPARC has been exposed to acid, and the second time that it has been exposed to physiological activity. In addition, the fusion protein was constructed and introduced into B16BL6 cells. The cells were cultured at acidic pH, and about 8-kDa fragments were found on the C-terminal side. Now, this fragment and cut site, cut off enzyme, cut off enzyme, cut off enzyme.

项目成果

Both direct and collagen-mediated signals are required for active vitamin D3-elicited differentiation of human osteoblastic cells:: Roles of osterix, an osteoblast-related transcription factor

• DOI: 10.1016/j.matbio.2005.09.001
• 发表时间: 2006-01-01
• 期刊: MATRIX BIOLOGY
• 影响因子: 6.9
• 作者: Maehata, Y;Takamizawa, S;Hata, RI
• 通讯作者: Hata, RI

Inostamycin suppresses vascular endothelial growth factor-stimulated growth and migration of human umbilical vein endothelial cells

• DOI: 10.1007/s10585-005-0041-0
• 发表时间: 2004-01-01
• 期刊: CLINICAL & EXPERIMENTAL METASTASIS
• 影响因子: 4
• 作者: Baba, Y;Kato, Y;Tsukuda, M
• 通讯作者: Tsukuda, M

Acidic extracellular pH induces matrix metalloproteinase-9 expression in mouse metastatic melanoma cells through the phospholipase D - mitogen-activated kinases signaling

酸性细胞外 pH 通过磷脂酶 D - 丝裂原激活激酶信号传导诱导小鼠转移性黑色素瘤细胞中基质金属蛋白酶 9 的表达

• 发表时间: 2005
• 期刊: Journal of Biological Chemistry (In Press)
• 作者: Kato;Y.;Lambert;C.A.;Alain;C.C.;Mineur;P.;Noel;A.;Frankenne;F.;Foidart;J.-M.;Baba;M.;Hata;R-I.;Miyazaki;K.;Tsukuda;M.
• 通讯作者: M.

Expression of SPARC in tongue carcinoma of stage II is associated with poor prognosis: an immunohistochemical study of 86 cases.

• DOI: 10.3892/ijmm.16.2.263
• 发表时间: 2005-08
• 期刊: International journal of molecular medicine
• 影响因子: 5.4
• 作者: Y. Kato;Y. Nagashima;Y. Baba;Toshiro Kawano;M. Furukawa;A. Kubota;S. Yanoma;Yukari Imagawa-Ishiguro;K. Satake;T. Taguchi;R. Hata;I. Mochimatsu;I. Aoki;Y. Kameda;Y. Inayama;M. Tsukuda

Type III collagen is essential for growth acceleration human osteoblastic cells by ascorbicacid 2-phosphate,a long-acting vitamin C derivative.

III 型胶原蛋白对于通过抗坏血酸 2-磷酸（一种长效维生素 C 衍生物）促进人类成骨细胞生长至关重要。

• 发表时间: 2007
• 期刊: Matrix Biology (In press)
• 作者: Maehata;Y.;Takamizawa;S.;Ozawa;S.;Izukuri;K.;Kato;Y.;Sato;S.;Lee;M.-C.;Kimura;A.;Hata;R.-I.
• 通讯作者: R.-I.