疾病関連因子を制御する転写因子の構造解析

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Streptmyces coelicolor A3(2)由来SC06571の結晶の非対称単位中の6分子のそれぞれは,TIMバレル構造をとり,3つの2量体が,それぞれの持つ2回軸と直交する3回軸で会合して,全体として点群D_3に属していることがわかった.TIMバレルを持つ蛋白質には,さまざまな異なる反応を触媒する酵素が存在する.Daliサーバーを使ったホモロジー蛋白質のサーチによると,放線菌のキシロースイソメラーゼなど,イソメラーゼファミリー蛋白質が高いZスコアーを示した.しかし,これらホモログ蛋白質の会合状態はSC06571と異なっている.幾つかのものは単量体として働き,他のものは2量体や4量体として存在している,これらの中で2量体の会合状態がSC06571と最も似ているのは,D-fructose and D-psicoseの相互変換を触媒するDPEaseであった.しかし,SC06571の2量体会合の方が,DPEaseよりもさらに緊密な会合状態を示している.上に述べたように,SC06571では,さらにこれが会合して6量体の構造をとっているが,これはイソメラーゼファミリー蛋白質としてはじめての例である.この成果はProtein & Peptide Lettersに投稿,現在,印刷中である.また,昨年度までに大量発現,精製に成功していたetsがん遺伝子群転写因子EIAFについては,結晶化スクリーニングを実施し,さらに結晶化条件を精査することによって,回折実験可能な結晶を得ることに成功した.SPring-8でのデータ収集の結果,分解能3.5Å,空間群C2,格子定数はa=247Å,b=73.4Å,c=134.4Å,β=120.6°であることが判明した.現在,多波長異常散乱法による構造解析を行うために,Se-Met置換蛋白質を調製中である.