糖鎖-蛋白質の特異的相互作用を利用した、毒素検知センサー開発のための基盤研究

利用特定糖链-蛋白质相互作用开发毒素检测传感器的基础研究

• 批准号: 05F05633
• 负责人: 鵜沢 浩隆
• 金额: $ 1.54万
• 依托单位: National Institute of Advanced Industrial Science and Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-05F05633/
• 关键词: センサー; 糖鎖合成; シアル酸

本研究では、国内で社会問題となっている院内感染や食中毒の感染原因である黄色ブドウ球菌の生産するα-トキシンを選択的に検出するセンサー開発のための基盤研究を行った。α-トキシンは、シアル酸を末端に有する5糖:Neu5Acα2-3Ga1β1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glcに結合することが知られている。昨年度までにこの5糖のうち、毒素認識に重要な非還元末端側の3糖(下線部)の完全保護体の合成まで行った。本年度は、この3糖完全保護体の脱保護をはじめに試みた。アセチル基、シリル基、ベンジリデン基等で保護した3糖をBu_4NF, NaOMe/MeOH-H_2O, Pd(OH)_2/H_2の順で処理して、還元末端側の配糖体のアジド基がアミノ基に還元された3糖Neu5Acα2-3Ga1β1-4GlcNAcβ1- (spacer)-NH_2を3工程65%で得ることに成功した。又、類似の方法により、アセチル基で保護した位置異性体Neu5Acα2-6Ga1β1-4GlcNAcの完全保護体も合成した。NaOMe/MeOH-H_2Oで処理して目的とするNeu5Acα2-6Ga1β1-4GlcNAcβ1-(spacer)-N_3を得ることに成功した。5糖については、次のように検討している。ベンジル基で保護したラクトースに適当なスペーサーを導入した2糖誘導体をアクセプターとし、NIS, TMSOTfの存在下、4',6'位をベンジリデン基で保護したチオ2糖誘導体、又は、主にアセチル基で保護したチオ2糖誘導体を反応させ、各々、4糖を合成した。前者のベンジリデン基を脱保護して非還元末側の4,6位が遊離した4糖に変換した。後者は、脱アセチル化、イソプロピリデン化、アセチル化、脱イソプロピリデン化を経て4糖誘導体とした。これらの3位又は6位にNeuNAcを導入することを検討しているが、収率の点で改善の余地がある。又、先に合成した2種類の3糖については、還元末端側にアミノ基を有しているので、ここにリボ酸の導入を試みた。現在、金基板への固定化を試み、SPRによるレクチンの結合能を検討中である。

This study was conducted to investigate the causes of nosocomial infection and food poisoning in China and to investigate the development of nosocomial infection in China. The α-amino acid terminal has five sugars:Neu5Acα2-3Ga1β1-4GlcNAcβ1-3Galβ1-4Glc. Last year, the synthesis of the complete protective body of the 5-saccharide and toxin recognition was carried out. This year, the three sugar completely protected body and deprotection In this paper, we studied the structure of NH_2-NH_3-NH_2-NH_3-NH_3-NH_2-NH_3-N In addition, a similar method was used to synthesize the completely protected position variant Neu5Ac α2- 6Ga 1β1-4GlcNAc. NaOMe/MeOH-H_2O system was successfully synthesized by the reaction of Neu5Acα2- 6Ga 1β1-4GlcNAcβ1-(spacer)-N_3. 5 sugar, sugar, sugar. In the presence of NIS, TMSOTf, the 4'and 6' positions of the sugar inducer are protected by the protective group, and the main group is protected by the 2-sugar inducer. The former is deprotected from the 4 and 6 positions of the non-reducing element and replaced by the 4 sugar positions. The latter is composed of four sugar inducers, namely, depolymerization, depolymerization, and depolymerization. The 3-bit and 6-bit NeuNAc are introduced. In addition, the first synthesis of 2 kinds of 3 sugars, the terminal side of the reduction element, the introduction of acid Now, the immobilization of gold substrate, SPR and binding energy model are discussed.